當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測>> Caspase 7抑制劑200ul使用說明書
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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 7抑制劑200ul使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
Caspase 7抑制劑200ul使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
CaES-17(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CM-M053小鼠卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CaEs-17細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞 人腦瘤細(xì)胞,SF767細(xì)胞 敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]
CD55 Others Human 人 CD55 / DAF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0242Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IL17RB Others Human 人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人支氣管平滑肌細(xì)胞cDNAHBSMC cDNA
小型豬腎細(xì)胞;MPK 畸胎癌細(xì)胞,P19細(xì)胞 W256細(xì)胞,Walker氏癌肉瘤256瘤株
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001A
HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
PADI4 Others Human 人 PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
前脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
615小鼠癌瘤株;Ca763
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞,小鼠原成骨細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞系,LM-6細(xì)胞 CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL
TNFRSF1A Others Human 人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)免疫試劑盒 Human SDPR ELISA Kit
人抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 ,英文名: RBC ELISA Kit
RatInterferonα,IFN-αELISA試劑盒大鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangastrin-reliasingpeptide,GRPELISA試劑盒人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin12,IL-12/P70ELISAKit人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒
Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit 人*(PK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAnti-Saccharomycescerevisiaeantibody,ASCAELISA試劑盒人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
HumanTrypsinogen-2,Try-ⅡELISAKit人*原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase 7抑制劑200ul使用說明書小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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