Annexin V-APC / 7-AAD 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒100T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
Annexin V-APC / 7-AAD 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒100T免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Annexin V-APC / 7-AAD 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒100T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CL-0053Calu-1(人肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

GALNT2 Others Human 人 GALNT2 / GalNAc-T2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

ZR-75-30細(xì)胞，人癌細(xì)胞系 人T淋巴細(xì)胞(白血病CD8+),Molt-4細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5

二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-

CPE Others Human 人 CPE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人成纖維細(xì)胞總RNAHMF tRNA

IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome

PANC-1細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人橫紋癌細(xì)胞,A673細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF

HO-8910(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(*) 100ml
DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

破骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317

LTEP-P細(xì)胞，人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠前成骨細(xì)胞,MC-3T3細(xì)胞 CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

TF-1(人血液白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

NHDF-c 正常人皮膚成纖維細(xì)胞(NHDF)來自少年者 x500,000cells 氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
鵝P450*側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血栓素A2(TX-A2)免疫試劑盒 Human Thromboxane A2,TX-A2 ELISA Kit

人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒 ，英文名： EMA IgA ELISA Kit

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanGamma-aminobutyricacid,GABAELISA試劑盒人γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humaninterferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒

HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-presynapticmembraneantibody,PsmAbELISA試劑盒人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞染色體分離試劑盒20次

HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISAKit人特異生長因子/相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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