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Caspase 8 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測(cè)

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Caspase 8 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
Caspase 8 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Acc-2(人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CL-0181P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HR-8348細(xì)胞,直腸腺癌 人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞,JK(Jurkat)細(xì)胞 人小細(xì)胞肺癌;NCI-H2227

大額牛皮膚細(xì)胞;BFR-S3

ERBB2 Others Human ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物HUASMCL

IL1RL1 Others Mouse 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4 III型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞 Human

CA9 Others Mouse 小鼠 CAR9 / CAIX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
VSTM1 Others Human VSTM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)

彈性蛋白酶(100mL酶解緩沖液) 10mL

SGC-7901人胃腺癌細(xì)胞 SGC-7901 human gastric cancer cells 1640+10% FBS

IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 Rattus
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP2 ELISA Kit

人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanfibrinopeptideB,FPBELISAKit 96T/48T

大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)免疫試劑盒 Rat annexin I,ANX-I ELISA Kit

英文名稱RatreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit大鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格:96T/48T

酵母菌*補(bǔ)充混合(CSM)培養(yǎng)基100毫升

ELISAKitFK506人*規(guī)格:48T/96T
小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgMELISA Kit 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgMELISA試劑盒

humanthyroid-stimulatinghormonereceptorantibody,TSHRELISAKit 人促甲狀腺激素受體抗體(TSHR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-neutrophilantibody,ANAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)*試劑盒(包括抗體)10

humanUltrasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase 8 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測(cè)小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠膽囊收縮素8CCK-8ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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