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更新時間:2017-07-05 12:26:41瀏覽次數(shù):162次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)線粒體膜電位檢測試劑盒(TMRE法)50T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
線粒體膜電位檢測試劑盒(TMRE法)50T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
線粒體膜電位檢測試劑盒(TMRE法)50T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
6T-CEM (人T細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0280HEL(人紅白細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
L1細胞,卵巢癌細胞 急性T細胞白血病細胞),Jurkat細胞 人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1
人胚肺成纖維細胞;CCC-HPF-1
ANPEP Others Mouse 小鼠 ANPEP / APN / CD13 人細胞裂解液 (陽性對照)
內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基ECM-prf
IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細胞株(HEK293);APP-PS1
SUNE-1細胞,低分化鼻咽癌細胞系 鼠黑色素瘤細胞系,B16-Fo細胞 CM-H031人食管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
NR8383(大鼠肺泡巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-26140 Placental Epithelial CellGrowth Medium KIT, 胎盤上皮細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
腦微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HSC-T6 大鼠肝星形細胞
犬腎細胞;MDCK/IgR
5637, 人膀胱癌細胞
人喉癌上皮細胞;Hep-2 大鼠食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠葡萄糖激酶(GK)ELISA試劑盒 ,英文名: GK ELISA Kit
人血小板生長因子(PGF)ELISA檢測試劑盒Humanplaetgrowthfactor,PGFELISAKit 96T/48T
魚*(Cortisol)免疫試劑盒 Fish Cortisol ELISA Kit
CLIAKitforPF(HumanPemphigusFoliaceus)ELISAKit人落葉型天皰瘡抗體規(guī)格:48T/96T
食物維生素A含量比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitE人雌激素規(guī)格:48T/96T
小鼠肌肝(Cr)ELISA試劑盒 組裝/原裝
Rat lymphocyte function associated antigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 大鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒
HumanRetinolbindingprotein,RBPELISAKit 人*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-lymphocytotoxicantibody,ALA/LCAELISA試劑盒人抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDPglucosepyrophosphorylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit人*8(KLK8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
線粒體膜電位檢測試劑盒(TMRE法)50T免費代測小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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