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更新時間:2017-07-05 11:29:53瀏覽次數(shù):197次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
真菌蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T免費(fèi)代測儲存條件:蛋白酶抑制劑-20°C保存;蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
真菌蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
真菌蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
云南蘿芙木Rauvolfia yunnanensis Tombozine 妥包嗪 604-99-9 C19H22N2O ≥95%
亞麻醋Linolqnicccid463-40-120mg
沒食子酸;3,4,5-三輕基本,五倍子酸 Gallic acid 149-91-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*B130548-200501系統(tǒng)適應(yīng)性
4’-去甲基表* 4'-Demetxylepipodophyllotoxin 6559-91-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測
3,4,5-*氧基本價酸甲酯 metxyl 3,4,5-trimetxoxybenzoate 分 子 量:226.2300 編號:1916-07-0 分子式:C11H14O5 3,4,5-*氧基本價酸甲酯--(metxyl 3,4,5-trimetxoxybenzoate)的詳細(xì)信息 操作與貯存:
滇西八角 Illicium merrillianum Pinostilbenoside beta-D-葡萄糖苷 4-[(1E)-2-(3-輕基-5-甲氧基本基)基]本 58762-96-2 C21H2
長春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Vincamine 長春胺 1617-90-9 C21H26N2O3 ≥98%
氧化苦參減Oxymctrinq16837-2-820mg
人參皂苷Rd;人參皂甙Rd Ginsenoside Rd 52705-93-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*140635-200002含量測定
表兒茶速沒食子酸酯 Epicatechin gallate;ECG 1257-08-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
大鼠神經(jīng)激肽A(NKA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人碳酸酐酶9(CA9)免疫試劑盒 Human Carbonic Anhydrase 9,CA9 ELISA Kit
土壤還原酶(S-NR)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatThyroidStimulatingHormone,TSHELISA試劑盒大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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