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更新時間:2017-07-05 11:27:35瀏覽次數(shù):145次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
藻類膜蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
藻類膜蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
藻類膜蛋白提取試劑盒50T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
知母Anemarrhena asphodeloides Bge. Timosaponin AⅢ 知母皂苷AⅢ 41059-79-4 C39H64O13 ≥98%
酰纈草三酯ccqtylvclqricnthrqstqr20mg
毛蘭素 Erianin 95041-90-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*B130540-200301系統(tǒng)適應(yīng)性
3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黃酮 3,5,6,7,8,3’,4’-heptemthoxyflavone 20mg HPLC≥9
2-異丙醇系統(tǒng)適用性 3X1ml標(biāo)準(zhǔn)品 ea
綿棗兒Scilla scilloides 1,3,6-三輕基-4,5-二甲氧基-8-甲基-9H-氧雜意-9-同 773850-91-2 C16H14O7 ≥95% 乙安丁醇:用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y0000803
1,4-Sorbitan 1,4-脫水山梨糖醇標(biāo)準(zhǔn)品27299-12-3 300mg
Bemotrizinol雙-乙基乙氧本酚甲氧本基三嗪標(biāo)準(zhǔn)品187393-00-6200mg
龍牙草Agrimonia pilosa Agrimonolide 6-O-
54048-10-1 依托孕烯標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 50mg
氧化芍藥苷Oxidationofpaeoniflorin39011-91-1HPLC≥98%,20mg/支
Lyoniside 南燭木糖甙 34425-25-7
安磺樂靈 標(biāo)準(zhǔn)品 號:19044-88-3 100mg
松苓新酸 29220-16-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
小鼠膽囊收縮素八肽(CCK8)ELISA試劑盒 ,英文名: CCK8 ELISA Kit
人糖化蛋白(GSP)ELISA檢測試劑盒Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 96T/48T
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英文名稱RatActininαELISAKit大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(Actininα)規(guī)格:96T/48T
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ELISAKitPLAP人胎盤堿性磷酸酶規(guī)格:48T/96T
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat folic acid (FA) ELISA Kit 大鼠*(FA)ELISA試劑盒
Humanepstein-barrvirusIgA,EBvIgAELISAKit 人EB病毒IgA(EBvIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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犬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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