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更新時(shí)間:2017-07-05 11:11:11瀏覽次數(shù):167次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
我司無蛋白封閉液500ml售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
無蛋白封閉液500ml售后服務(wù)儲(chǔ)存條件:2-8°C保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
在WB和ELISA實(shí)驗(yàn)中,需要用封閉試劑將膜或酶標(biāo)板孔中的未被抗原或抗體占據(jù)的位點(diǎn)進(jìn)行進(jìn)行封閉,通常的封閉試劑有BSA,脫脂奶粉等,但是BSA中有少量的抗體殘留,導(dǎo)致抗原/抗體之間的交叉反應(yīng),產(chǎn)生高背景,雜帶較多或使得本底水平增高,同樣脫脂奶粉中含有少量的*和堿性磷酸酶殘留,在使用*-親和素系統(tǒng)和堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗時(shí),也會(huì)使得高背景或本底水平增高,脫脂奶粉中含有的酪蛋白和堿性磷酸酶殘留也使得其不適用于磷酸化蛋白的檢測。
無蛋白封閉液500ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
無蛋白封閉液500ml售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
射干 Belamcanda chinensis (L.) DC Tectoridin 射干苷 611-40-5 C22H22O11 ≥98%
油醋Olqicccid11-80-10.1ml
蘆竹減;禾草減;3-二甲安基甲基吲哚 Gramine 87-52-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定*100864-200601常溫,避光100mg
異補(bǔ)骨脂二氫黃酮 Isobavachin 31524-62-6 20mg HPLC≥98% 異補(bǔ)骨脂二氫黃酮用于含量測定
26921-17-5 馬來酸*標(biāo)準(zhǔn)品(N/A) 100mg
抗?fàn)钕偾虻鞍卓贵wAntithyroidglobulinantibody4000IU/支
Kushenol X 254886-77-6
Mangafodipir Triwo7ium錳福地吡三鈉標(biāo)準(zhǔn)品140678-14-4 200mg錳福地吡三鈉標(biāo)準(zhǔn)品
甲基麥冬高黃酮A 74805-90-6 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
125273-88-3 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
葉底珠Securinega suffruticosa 蒜糖醇 488-44-8 C6H14O6 ≥95% 香茅醇0 6711
2,3-Dixy7nopodocarpusflavone A 852875-96-8
Loracarbef 錄碳頭孢標(biāo)準(zhǔn)品121961-22-6 200mg錄碳頭孢標(biāo)準(zhǔn)品
褪黑素 73-31-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
大鼠鼠狂犬病毒(RV/PRV-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人天青殺素/肝素結(jié)合蛋白(AZU/HBP)免疫試劑盒 Human Azurocidin/Heparin Binding Protein,AZU/HBP ELISA Kit
β-木糖苷酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatSomatostatin,SSELISA試劑盒大鼠*(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humankeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanNeural-Cadherin,N-CadELISAKit人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 人血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒
HumanNephrinELISAKit 人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanEuglobulinLysis,ELELISA試劑盒人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織S腺苷同型半*核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次
HumanOrexinAELISAKit人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無蛋白封閉液500ml售后服務(wù)人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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