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更新時間:2017-07-05 10:48:24瀏覽次數(shù):217次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)植物膜蛋白提取試劑盒50T實驗方法光葉巴豆Croton laevigatus 5,6,7,8-Tetrametxoxycoumarin 5,6,7,8-四甲氧基 56317-15-8 C13H14O6 ≥95%
異綠原醋BBISOchlorogqnicccid20mg/支
金絲桃素 Hypericin 548-04-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定鹽酸阿撲100839-200601常溫,避光100mg
甲基麥冬黃酮B metxylophiopogonone B 20mg HPLC≥98% 甲基麥冬黃酮B
產(chǎn)品名稱:植物膜蛋白提取試劑盒50T實驗方法
儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
跨膜蛋白承擔各種生物功能,在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
植物膜蛋白提取試劑盒50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物膜蛋白提取試劑盒50T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物膜蛋白提取試劑盒50T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
246021-75-0 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 20mg
大馬 sativa 大馬色原烯 20675-51-8 C21H30O2 ≥98% 可替寧0 8 5
對輕基本乙酯 言酸依替福林標準 丁子香酚標準品
來扶米特相關(guān)物質(zhì)B標準品108605-62-5 10mg來扶米特相關(guān)物質(zhì)B標準品
甲基* 11013-97-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
茶葉 Camellia sinensis(L.)O.Kuntze Theaflavine-3,3'-digallate 茶黃素-3,3'-雙沒食子酸 33377-72-9 C43H32O20 ≥98%
異佛手柑內(nèi)酯Isobqrgcptqn48-48-420mg
冬青苷O;冬青甙O Ilexgenin O 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*·3/2H2O130531-200201僅供紅外鑒別(3/2分子結(jié)晶水)
靈芝酸A Ganoderic acid A 81907-62-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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