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更新時間:2017-07-05 10:47:59瀏覽次數(shù):176次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)植物膜蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:植物膜蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測
儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
植物膜蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物膜蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
水紅木Viburnum cylindricum 4',9,9'-Trixy7noxy-3'-metxoxy- 3,7'-epoxy-4,8'-oxyneolignan none 144881-21-0 C19H22O6 ≥95%
異綠原醋CCISOchlorogqnicccid20mg/支
金絲桃苷;槲皮素-3-半乳糖苷 Hyperoside 482-36-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*0485-9901含量測定
錄化天竺葵素 Di-tert-octyl Disulfide
2455-14-3 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
重齒毛當(dāng)歸 Angelicae pubescens 二輕歐三芹醇當(dāng)歸酸酯 5058-13-9 C19H20O5 ≥98% 言酸美沙同 - 對照譜圖(M0800000
聯(lián)本標(biāo)準(zhǔn)品 聯(lián)本三坐醇標(biāo)準(zhǔn)品 林丹標(biāo)準(zhǔn)品
Adenosine腺苷標(biāo)準(zhǔn)品58-61-7200mg
荷葉堿 475-83-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
景東山橙Melodinus khasianus Olivil 橄欖樹脂素 2955-23-9 C20H24O7 ≥98%
異佛手柑內(nèi)酯IsobqrgcptqnHPLC≥98%;20mg/支
喜樹 Camptotheca acuminata Decne. Topotecan HCl 言酸拓?fù)涮婵?/span> 119413-54-6 C23H24ClN3O5 出面石巖石成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(G07110(GSR-8
中藥對照藥材槐米121270-200401TLC法鑒別
Hispidulin澤蘭黃酮 純度:≥98%
小鼠γ-基丁酸A受體α2(γABRα2)ELISA試劑盒 ,英文名: γABRα2 ELISA Kit
人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA檢測試劑盒Humanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit 96T/48T
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)免疫試劑盒 Rat fibroblast growth factor 6,FGF6 ELISA Kit
英文名稱Ratgp130ELISAKIT大鼠gp130規(guī)格:96T/48T
抗體/蛋白HRP標(biāo)記制備試劑盒5次(100微克/次)
ELISAKitPGE1人前列腺素E1規(guī)格:48T/96T
兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human atrial natriuretic peptide (ANP) ELISA Kit 人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒
Humananti-PL12-antibody,PL12/AlaRSELISAKit 人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanelectron-transfer-flavoproteinbetapolypeptide,ETFBELISA試劑盒人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PI3K激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanpeptidemajorhistocompatibilitycomplex,pMHCELISAKit人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物膜蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人不對稱二甲基精酸(ADMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人補(bǔ)體受體1(CR1/CD35)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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