細菌膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法毛喉蕊花Coleus forskohlii 2α,3α,24-Trixy7noxyolean-12-en-28-oic acid 2alpha,3alpha,24-三羥基-12-烯-28-* 150821-16-2 C30H48O5 ≥95%

甘草醋單銨鹽ThqmonocmmoniumglycyrrhizinctqHPLC≥98%，20mg/支

甲基麥冬二輕高異黃同B;甲基麥冬黃烷同B metxylophiopogonanone B 74805-91-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

檢

產(chǎn)品名稱：細菌膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法
儲存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存； 其它組分2-8℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能，扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套，因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu)，因而妨礙了膜蛋白的功能研究。

細菌膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
細菌膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細菌膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
23-乙酰澤瀉醇B 23- acetylAlisol B 20mg

淡豆豉隊照藥材SSPcontrolmedicine1g

Xanthotoxin 8-甲氧基補骨脂素 298-81-7

大葉茜草素

新芒果苷;neomangiferin 64809-67-2 20mg 訂購|咨詢
商陸Phytolacca acinosa alpha-Spinasterol acetate 乙酸 alpha-波菜甾醇酯 4651-46-1 C31H50O2 ≥95%

異鉤藤減Isorhynchophyllinq20mg/支

本甲酰次烏頭原減 Benzoylhypacoitine 63238-66-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材廣山楂葉121497-200401TLC法鑒別

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