革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法云南鼠尾草Salvia yunnanensis 2,3,24-Trixy7noxy-12-ursen-28-oic acid 2ALPHA,3ALPHA,24-三羥基烏蘇-12-烯-28-酸 89786-83-4 C30H48O5 ≥95%

白藜蘆醇Rqsvqrctrol20mg/支

黃芩素-7-甲迷;黃岑素-7-甲迷;5,6-二輕-7-甲氧基黃同 7-O-metxylbaicalein: 6-Dixy7noxy-7-metxoxyflavone:Negletein 29550-13-8 20mg HPL

產(chǎn)品名稱：革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存；蛋白穩(wěn)定劑-20℃保存；蛋白提取液室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

革蘭氏陽性菌總蛋白提取試劑盒可以從各種革蘭氏陽性菌菌體中提取總蛋白，可用于純化蛋白的粗品制備及總蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質(zhì)量的蛋白提供了。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性，可用于報(bào)告基因檢測、SDS-PAGE電泳檢測、Westernblotting、凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活分析等下游實(shí)驗(yàn)。

革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
23076-35-9 鹽酸甲本噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

白藜蘆醇Resveratrol40mg

19(S)-xy7noxyconopharyngine 20-輕基榴花減 16790-93-5

Pentazocine CIV*標(biāo)準(zhǔn)品359-83-1 500mg*標(biāo)準(zhǔn)品

康普瑞汀磷酸二鈉 168555-66-6 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
望江南Cassia occidentalis Torososide A none 165689-32-7 C38H32O15 ≥95%

異虎耳草速Isopimpinqllin1948-7-920mg

綿馬酸ABA Filixic acid ABA 38226-84-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定*100901-200601常溫，避光100mg

6-姜酚;6-姜辣素;姜酮醇 6-Gingerol 23513-14-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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