膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱：膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書
儲(chǔ)存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存； 蛋白提取液A和B 2-8℃保存；試劑C室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

哺乳動(dòng)物跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能，在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套，因此膜蛋白樣本制備成為一個(gè)難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會(huì)使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu)，因而妨礙了膜蛋白的功能研究。

膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
丁香樹Clove tree Syringaresinol-di-O- glucoside 丁香樹脂醇雙葡萄糖苷 66791-77-3 C34H46O18 ≥98%

紅景天苷SclidrosidqHPLC≥98%;20mg/支

花椒毒酚;8-輕基補(bǔ)骨脂素;花椒毒醇 Xanthotol 2009-24-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

對(duì)照品錄霉素二醇物130436-200503檢查

Petunidin 3-arabinoside chloride矮牽牛素阿拉伯糖苷純度：
2216-51-5 (-)-薄荷醇(GC萜烯標(biāo)準(zhǔn)品) 1g

黃花蒿 Artemisia annua 脫氧青高素 72826-63-2 C15H22O4 ≥98% L-本丙安酸(P1150000

對(duì)照品維生素E10062-0007含量測(cè)定

Flavoxate Related Compound C黃酮哌酯相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品35888-94-9 20mg黃酮哌酯相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品

細(xì)辛Asarum (-)-Ain 細(xì)辛脂素 133-04-0 C20H18O6 ≥98%
九里香 Orange Jessamine 1g

異鳥苷Isoguanosine1818-71-9HPLC≥98%，20mg/vial

PalMatine 巴馬亭 3486-67-7

培養(yǎng)基適應(yīng)性沙門、志賀菌屬瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基135010-201002常溫，避光18.0g/400ml

豨薟醚酸 siegesmetxyicacid 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人胃癌標(biāo)志物免疫試劑盒 human gastric carcinoma Marker ELISA Kit

*測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣

RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISA試劑盒大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanMethylaseELISAKit人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子胰島素(INS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human plasminogen / plasmin (PL/Fbn) ELISA Kit 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒

HumanExtractablenuclerantigen,ENAELISAKit 人可提取核抗原(ENA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancytotoxicTlymphocyteassociatedantigen4,CTLA-4ELISA試劑盒人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織II型L-3羥酰基-CoA脫氫酶/β淀粉樣蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

HumanPlasminogen，PlgELISAKit人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T使用說明書人骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*巰基轉(zhuǎn)移酶（GST）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝