凍存樣本核蛋白提取試劑盒100T使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：凍存樣本核蛋白提取試劑盒100T使用說明書
儲存條件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

凍存樣本核蛋白提取試劑盒適用于從各種經(jīng)過凍存的細(xì)胞和各種實體組織中提取核蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。制備的核蛋白純度高，較少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。

凍存樣本核蛋白提取試劑盒100T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
凍存樣本核蛋白提取試劑盒100T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
云木香Saussurea lappa Sulfocostunolide A 磺酸基木香烯內(nèi)酯 A 1016983-51-9 C15H20O5S ≤90%

雙去氧基姜皇速Bisdqmqthoxycurcumin20mg/支

湖貝甲素;梭砂貝母減;新貝母減 Hupehenine 98243-57-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品舒巴坦130430-200305含量測定

Mitraphylline帽柱葉堿純度：>98%
219921-94-5 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

蛹蟲草 Cordycepsmilitaris 蟲草素 73-03-0 C10H13N5O3 ≥98% 言酸甲扶喹(M025 000

百草枯二錄鹽(P 百科(聯(lián)本三坐醇 百菌清標(biāo)準(zhǔn)品

西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品55011-89-7200mg

補骨脂酚 10309-37-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
迷迭香 rosmarinus officinalia L. Rosmarinic acid 迷迭香酸 20283-92-5 C18H16O8 ≥98%

異去輕鉤藤減IsocorynoxqinqHPLC≥98%;20mg/支

綿馬素AA ;綿馬酸AA Albaspidin AA 3570-40-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定纈沙坦 100651-200902常溫，避光100mg

Powdered Andrographis Extract*提取物標(biāo)準(zhǔn)品90244-84-1500mg
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