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更新時間:2017-07-05 10:20:12瀏覽次數(shù):234次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)骨組織蛋白提取試劑盒100T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
骨組織蛋白提取試劑盒100T使用說明書儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白穩(wěn)定劑2-8℃保存;蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
骨組織總蛋白提取試劑盒適用于從各種動物骨組織中樣品中提取總蛋白。可以提取各種密質(zhì)骨與松質(zhì)骨、軟骨組織樣品。提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒蛋白提取液能充分裂解骨細胞,成骨細胞、破骨細胞,其中含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
骨組織蛋白提取試劑盒100T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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鱧腸Eclipta prostrata Stigmasterol glucoside 豆甾醇葡萄糖甙 19716-26-8 C35H58O6 ≥97%
咖非醋Coffccid20mg/支
厚樸酚 Magnolol 528-43-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*0426-9101含量測定
Malvidin 3-arabinoside chloride錄化錦葵色素-3-O-阿拉伯糖苷純度:
215447-89-5 貝那普利相關(guān)物質(zhì)A標準品 25mg
青牛膽 _Tinospora sagittata(Oliv#)Gagnep# D-四輕藥根減 13063-54-2 C20H23NO4 ≥98% 莽草酸1920-100
六錄本標準品 六錄丙同標準品 流雙危標準品
鹽酸*標準品64-73-3200mg
遠志山酮III 162857-78-5 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
正丙醇 Normal propyl alcohol 1ml
異數(shù)李速-3-O-葡萄糖苷皇色粉末HIsorhcmnqtin-3-O-glucosidqyqllowpowdqrH2041/8/7HPLC≥98%;10mg/vial
雞屎藤苷 paederoside 20547-45-9 0.98 10mg/支
大黃素甲醚521-61-9Physcion
千金子二萜醇 Lathyrol 34420-19-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
大鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)免疫試劑盒 Human pro-gastrin-releasing peptide,ProGRP ELISA Kit
檸檬酸合酶(CS)測試盒 可見分光光度法 10管/9樣
Ratplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISA試劑盒大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInhibin,INHELISA試劑盒人抑制素(INH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMelatonin,MISAKit人褪黑素(MT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒
HumanMousemyeloperoxidase-antineutrophilcytoplasmicantibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancyclophilinB,CyPBELISA試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織HCK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIVIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
骨組織蛋白提取試劑盒100T使用說明書人基質(zhì)裂解蛋白(MAT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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