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NP-40裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-04 14:40:23瀏覽次數(shù):170次

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NP-40裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購(gòu)!

NP-40裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法儲(chǔ)存條件:-20℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

NP-40裂解液采用高品質(zhì)原料配制。用于各種常見(jiàn)的蛋白提取等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。NP-40裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IPco-IP等。NP-40裂解液的主要成分為50mMTris(pH7.4),150mMNaCl,1%NP-40以及sodiumpyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiumorthovanadatesodiumfluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑。

NP-40裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
NP-40裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
狹翅獨(dú)活Heracleum stenopterum Sphondin 6-甲氧基當(dāng)歸素 483-66-9 C12H8O4 97.5%

煙減Nicotinq20mg/

*;葛根黃同 Puerarin 3681-99-0 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

檢查用*雜質(zhì)A100772-200401常溫,避光20mg

pxenytoin wo7ium 本妥英鈉標(biāo)準(zhǔn)品630-93-3 200mg
202138-50-9 泰諾福韋酯富馬酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

補(bǔ)骨脂Psoralea corylifolia L 補(bǔ)骨脂乙素 20784-50-3 C20H20O4 98% 新橙皮甙-二輕查爾同(N0 99000

洛克沙胂標(biāo)準(zhǔn)品 言酸沙拉沙星標(biāo)準(zhǔn) 呋喃本烯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)

Polyetxylene Glycol 6000聚乙二醇6000標(biāo)準(zhǔn)品25322-68-3 1g聚乙二醇6000標(biāo)準(zhǔn)品

羥基*A 78281-02-4 HPLC98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
哈巴俄苷 Harpagoside 量:494.4900 編號(hào):19210-12-9 分子式:C24H30O11 別  名:哈巴俄甙;鉤果草甙;玄生甙 【性狀】為白色針狀結(jié)晶。

異型南五味子 Kadsura heterlita [Syn. Uvaria heterlita]. Seco-neokadsuranic acid A 開(kāi)環(huán)新五味子酸A C30H44O4 *(100 22

含量測(cè)定*100191-200305常溫,避光50mg

Gadodiamide 釓雙胺標(biāo)準(zhǔn)品131410-48-5 500mg

紅松Pinus koraiensis Matairesinol 羅漢松樹(shù)脂酚 580-72-3 C20H22O6 98%
大鼠前列腺素F2α受體(PTGFR)ELISA試劑盒 ,英文名: PTGFR ELISA Kit

人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISAKit 96T/48T

魚(yú)透明質(zhì)酸(HA)免疫試劑盒 Fish Hyaluronic acid,HA ELISA Kit

CLIAKitforPG-C(HumanPepsinogenC)ELISAKit人*原C規(guī)格:48T/96T

食物抗壞血酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20

ELISAKitCCSA-2人大腸癌專一抗原2規(guī)格:48T/96T
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human hepatitis E virus IgM (HEV-IgM) ELISA Kit 人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒

Humananti-calmodulinspecificantibody,CaM-abELISAKit 人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancrystalproteinsα,CryαELISA試劑盒人晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20

HumanProstaglandinDsynthase,PTGDSELISAKit人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
NP-40裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIVIgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIVIgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(anti-RVIgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體(anti-RVIgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

我司NP-40裂解液100ml實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢

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