當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> NP-40裂解液50ml免費代測
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更新時間:2017-07-04 14:40:02瀏覽次數(shù):112次
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NP-40裂解液50ml免費代測儲存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
NP-40裂解液采用高品質(zhì)原料配制。用于各種常見的蛋白提取等相關(guān)實驗。NP-40裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP和co-IP等。NP-40裂解液的主要成分為50mMTris(pH7.4),150mMNaCl,1%NP-40以及sodiumpyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiumorthovanadate,sodiumfluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑。
NP-40裂解液50ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
NP-40裂解液50ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
非洲馬鈴果Voacanga africana Spegatrine 斯配加春 47326-53-4 C20H25N2O2 ≥95%
金雀花減SpcrtqinqHPLC≥98%;20mg/支
格列風(fēng)內(nèi)酯 Griffonilide 61371-55-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品醌式*130413-200303檢查
Delphinidin 3-arabinoside chloride飛燕草素-3-阿拉伯糖苷純度:
2005-9-9 肖鉀標準品(易志爆) 5g
肥皂草速Saporin8047-12-20mg
metxyl 6-acetoxyangolensate metxYL 6-ACETOXYANGOLENSATE 16566-88-4
Verteporfin 維替泊芬標準品129497-78-5 200mg維替泊芬標準品
大葉茜草素;Rubimaillin 55481-88-4 20mg 訂購|咨詢
知母 Anemarrhena asphodeloides Bge. Timosaponin B III 知母皂苷BⅢ 142759-74-8 C45H74O18 ≥98%
異型南五味子丁速HqtqrotypicKcdsurcDingSu20mg
毛蕊花糖苷;賣角甾苷;類葉升苷 Acteoside 61276-17-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品*130541-200301含量測定
3,6-二芥子?;崽?/span> 3,6’-Disinapoyl sucrose 20mg HPLC≥90% 用于含量測定
大鼠前列環(huán)素(PGI2)ELISA試劑盒 ,英文名: PGI2 ELISA Kit
人細胞毒素(CTX)ELISA檢測試劑盒Humancytotoxin,CTXELISAKit 96T/48T
魚熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒 Fish Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit
CLIAKitforPF-3(Humanplaetfactor3)ELISAKit人血小板因子3規(guī)格:48T/96T
食物糖精(saccharin)含量高效液相色譜法法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitTSH人促甲狀腺素規(guī)格:48T/96T
豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat signal transduction molecule 1 (Smad1) ELISA Kit 大鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)ELISA試劑盒
Humanendomorphin-2,EM-2ELISAKit 人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCryoglobulin,CGELISA試劑盒人冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織D-乳酸比色法定量檢測試劑盒20次
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKit人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
NP-40裂解液50ml免費代測人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗肝微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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