當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> Western細(xì)胞裂解液50ml免費(fèi)代測
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
聯(lián)系方式:陳經(jīng)理查看聯(lián)系方式
更新時間:2017-07-04 14:38:02瀏覽次數(shù):104次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
Western細(xì)胞裂解液50ml免費(fèi)代測注意事項
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Western細(xì)胞裂解液50ml免費(fèi)代測儲存條件:裂解液室溫保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
Western組織細(xì)胞蛋白裂解液是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞和組織的裂解液。能裂解細(xì)胞并充分釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白產(chǎn)物大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的細(xì)胞和組織樣本,主要用于Western,免疫沉淀和免疫共沉淀等。
Western細(xì)胞裂解液50ml免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司Western細(xì)胞裂解液50ml免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
大豆Glycinemax(L.)merr Soyasaponin Ba 大豆皂苷Ba 114590-20-4 C48H78O19 ≥98%
原*ProtodioscinHPLC≥98%,20mg/支
遠(yuǎn)志皂苷A Onjisaponin A 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品新霉胺130411-200307檢查
Cyanidin chloride錄化花青素純度:>98%
20(S)原人參二醇 30636-90-9 藥理實(shí)驗(yàn)單體 (S型)原人參二醇
狼牙刺Sophora viciifolia 里查同 A 97938-31-3 C26H30O6 ≥96% 炭黑中碳同位素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(G04407
對照品*110713-200208含量測定
Bumetanide Related Compound B*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品28328-53-225mg*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
紅藤Sargentodoxa cuneata Dixy7noguaiaretic acid 二氫
8-O-乙酰山梔苷甲酯 57420-46-9 檢測用對照品 無
益母草 Leonurus sibiricus 言酸益母草減 24697-74-3 C14H22ClN3O5 ≥98% 鈦合金成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)BT9(G02502
Compound K人參皂苷CK分子式: C36H62O8
Maleic Acid 馬來酸標(biāo)準(zhǔn)品110-16-7 300mg
紅花石蒜 Lycoris radiata Dixy7nolycorine 二氫石蒜堿 6271-21-2 C16H19NO4 ≥98%
大鼠前動力蛋白2(PROK2)ELISA試劑盒 ,英文名: PROK2 ELISA Kit
人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA檢測試劑盒HumancytotoxicTlymphocyteassociatedantigen4,CTLA-4ELISAKit 96T/48T
魚*(NE)免疫試劑盒 Fish norepinephrine,NE ELISA kit
CLIAKitforPF-3ELISAKit大鼠血小板因子3規(guī)格:48T/96T
食物糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitTSHR人促甲狀腺激素受體抗體規(guī)格:48T/96T
豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human aconitase 2 (ACO-2) ELISA Kit 人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒
HumanNoradrenalineBitartas,NE-BELISAKit 人重*(NE-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancrosslinkedN-opeptideoftypeⅠcollagen,NTXELISA試劑盒人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20次
HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Western細(xì)胞裂解液50ml免費(fèi)代測人抗肌動蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗環(huán)胍酸肽抗體(CCP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSVIgM)ELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。