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更新時(shí)間:2017-07-04 14:35:53瀏覽次數(shù):148次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書(shū)
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品名稱:蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml使用說(shuō)明書(shū)
儲(chǔ)存條件:-20℃保存
有效期:一年
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物包含7種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64、EDTA,6種獨(dú)立的磷酸酶抑制劑CyclosporinA、SodiumFluoride、beta-GlycerophosphoricAcidDisodiumSalt、SodiumOrthovanadate、DisodiumMolybdateDihydrate、SodiumPyrophosphate
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin O 黃花香茶菜素 O 1169806-00-1 C28H40O4 ≥95%
原人參二醇ProtopcncxcdiolHPLC≥98%;20mg/支
川續(xù)斷皂苷乙 Dipsacoside B 33289-85-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材白土苓(短柱肖菝葜)121537-200501TLC法鑒別
ISOFORSKOLIN 異佛斯可林純度:>95%
1794-55-4 維拉帕米相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
姜黃 Curcuma longa L. 莪術(shù)二同 13657-68-6 C15H24O2 ≥98% 石蠟(軟(Y000091
Balsalazide Related Compound A*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品100mg
rbital CII標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
去氫鉤藤堿 630-94-4 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
紫*甙 Syringin (≥98%,HPLC) 118-34-3 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
油菜花分Rape flower 蕓苔素內(nèi)酯 80483-89-2 C29H50O6 ≥98% 扶卡泥 雜質(zhì)B
對(duì)照品鹽酸*100420-200301HPLC法含量測(cè)定用
*溶液混合物標(biāo)準(zhǔn)品50mg*溶液混合物標(biāo)準(zhǔn)品
臭牡丹Clerodendrum colebrookianum Cleroindicin E 長(zhǎng)管假茉莉素E 165197-71-7 C8H14O3 ≥96%
大鼠血沉(ESR)elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫試劑盒 Human ICAM-2 ELISA Kit
基酸(AA)含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
Ratoxidizedlowdensitylipoproteinantibody,OLAbELISA試劑盒大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanhypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISA試劑盒人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMatrixGlaProtein,MGPELISAKit人基質(zhì)γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠11β羥基類固醇脫氫酶(11β-HSD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human gastrin cell antibody (GCA) ELISA Kit 人胃泌素細(xì)胞抗體(GCA)ELISA試劑盒
PorcinePrednisoloneELISAKit 豬*龍(Prednisolone)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODNELISA試劑盒人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織COT激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinCarbonyl,PCELISAKit人羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml使用說(shuō)明書(shū)人抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗類固醇細(xì)胞抗體(SCA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗狂犬病毒抗體(anti-RV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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