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更新時(shí)間:2017-07-04 14:35:18瀏覽次數(shù):111次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)10片售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)10片售后服務(wù)儲(chǔ)存條件:2-8℃保存。
有效期:兩年。
產(chǎn)品簡介:
本蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。此抑制劑混合物適用于從哺乳動(dòng)物細(xì)胞、組織中提取蛋白,直接加入任何蛋白裂解液中,均能有效抑制蛋白酶的活性,更高效的提取目的蛋白。適用于WesternBlot和免疫共沉淀等。本品不含有EDTA,不影響金屬依賴蛋白的活性
蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)10片售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)10片售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin N 黃花香茶菜甲素 1169805-98-4 C25H40O4 ≥95%
原人參三醇Rcwginsqngthrclcohol20mg/支
川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷D Asperosaponin Ⅵ 39524-08-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定3-羥基-1-芐基吲唑100702-200401常溫,避光50mg
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大戟科植物光葉巴豆 Croton laevigatus Vahl none 76475-17-7 C21H22O6 ≥98% 土每素(O000000
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Sibutramine Related Compound B相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品20mg
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大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒 ,英文名: ANX-Ⅴ ELISA Kit
人細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA檢測試劑盒Humanintercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 96T/48T
羊α晶體B鏈(CRYAB)免疫試劑盒 Sheep Alpha-crystallin B chain,CRYAB ELISA kit
CLIAKitforPAI-1ELISAKit大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1規(guī)格:48T/96T
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ELISAKitCPN10人伴侶蛋白10規(guī)格:48T/96T
小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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Humanproteindisulfideisomerase,PDIELISAKit人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白酶抑制劑混合物片劑(EDTA Free)10片售后服務(wù)人抗磷脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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