產(chǎn)品名稱：Bradford 蛋白定量試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：染色液2-8℃保存。蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Bradford法（考馬斯亮藍(lán)法），是目前靈敏度高的蛋白質(zhì)測(cè)定法之一。當(dāng)Bradford染色液（考馬斯亮藍(lán)G250）和蛋白在酸性條件下結(jié)合時(shí)，溶液顏色由棕黑色轉(zhuǎn)為藍(lán)色，大吸光值波長(zhǎng)由456nm轉(zhuǎn)至595nm，吸光值與蛋白質(zhì)的含量在一定濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系，通過(guò)測(cè)定吸光值大小并對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)蛋白的吸光值，推算出蛋白濃度，實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測(cè)定的快速，穩(wěn)定和高靈敏度。Bradford染色液為2倍濃縮母液，便于儲(chǔ)存。

Bradford 蛋白定量試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Bradford 蛋白定量試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Bradford 蛋白定量試劑盒1000T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
白芷 A. dahurica (Fisch.) Benth. et Hook Scopoletin 東莨菪素 92-61-5 C10H8O4 ≥98%

刺五加苷EqlquthqrosidHPLC≥98%，20mg/支

橙皮素;5,7,3’-三輕基-4’-甲氧基黃烷同、圣草酚4’-甲基迷 Hesperitin 520-33-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

中藥對(duì)照藥材虎杖葉121534-200501TLC法鑒別

WITHANOSIDE IV 鹽酸奧克巴胺IV純度：>95%
176447-94-2 多非利特相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

杜虹花Callicarpa pedunculata none 1246012-25-8 C28H34O14 ≥95% 流酸長(zhǎng)春花減 - 對(duì)照譜圖(V0 05000

肖態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 異斯特維醇標(biāo)準(zhǔn)品 1，1，1，2-四錄

Lorazepam Related Compound A*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品2848-96-6 25mg*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品

桑根酮D 81422-93-7 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
鹽酸去氫駱駝蓬堿 Harmine xy7nochloride 分 子 量：248.7100 編號(hào)：343-27-1 分子式：C13H13ClN2O 別　　名：鹽酸-7-甲氧基-1-甲基-9H-比啶并(3,4-B)吲哚;哈爾堿鹽酸鹽;鹽酸哈爾明 藥理藥效：殺菌、止癢，抗銀屑病作用，抗作用。

油橄欖樹 Olea europaea L. Oleuropein 橄欖苦苷 32619-42-4 C25H32O13 異阿魏酸; -輕基-4-甲氧基肉桂酸(55 9

含量測(cè)定甘油三油酸酯111692-200501-20℃，避光0.15ml

Homatropine metxylbromide甲溴后馬托品標(biāo)準(zhǔn)品80-49-9 250mg

三尖杉 Cephalotaxus fortunei P.E. Homoharringtonine * 26833-87-4 C29H39NO9 ≥98%
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