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BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書

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更新時(shí)間:2017-07-04 14:32:24瀏覽次數(shù):262次

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BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書儲存條件:BCA 試劑室溫保存。蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+,Cu+BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,即可計(jì)算待測蛋白的濃度。BCA法快速靈敏、穩(wěn)定可靠,對不同種類蛋白質(zhì)檢測的變異系數(shù)非常。

BCA 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。在組織細(xì)胞蛋白提取過程中,常用濃度的去垢劑SDSTriton X-100,Tween 不影響檢測結(jié)果

BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
7PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
白曼陀羅 Datura metm L Scopolamine butylbromide *堿 149-64-4 C21H30BrNO4 98%

刺五加葉中InthqlqcvqsofcccnthopcncxsqnticosusHPLC98%,20mg/

橙黃決明素;橙鈍葉決明素 Aurantio-obtusin 67979-25-3 20mg HPLC98% 用于含量測定

中藥對照藥材土鱉蟲(地鱉)121533-200501TLC法鑒別

VASICINE HCL 鴨嘴花堿鹽酸鹽 純度:>95
17598-65-1 *丙標(biāo)準(zhǔn)品 100mg

抗*血清Serumantimannanpeptide

Farrerol 杜鵑素 24211-30-1

Itraconazole*標(biāo)準(zhǔn)品84625-61-6 100mg

紫萁酮 HPLC95%;20mg 訂購|咨詢
88546-55-8 *雜質(zhì)D對照品標(biāo)準(zhǔn)品(-20) 10mg

Citrus maxima 6,7-二輕薄荷素 264234-05-1 C21H24O6 95% 薄荷醇1 966-100

阿巴卡韋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品124752-25-620mg

頭孢吡肟相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品ea

熊果酸 77-52-1 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
小鼠磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)ELISA試劑盒 ,英文名: PDPK1 ELISA Kit

人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA檢測試劑盒Humancytokeratin20,CK-20ELISAKit 96T/48T

大鼠煙堿型乙酰*受體(N-AChR)免疫試劑盒 Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit

英文名稱RatHLA-2ELISAKit大鼠組織相容性抗原(HLA-2)規(guī)格:96T/48T

鈣泵SERCA蛋白表達(dá)檢測試劑盒20

ELISAKitLPS人脂多糖/內(nèi)毒素規(guī)格:48T/96T
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human motilin (MTL) ELISA Kit 人胃動素(MTL)ELISA試劑盒

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISAKit 人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCorticosterone,CORISA試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CORT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織CHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit人蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BCA 蛋白定量試劑盒1000T使用說明書人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelinAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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