磷酸酶抑制劑混合物5ml使用說(shuō)明書麻風(fēng)樹Jatropha curcas Schleicheol 2 (3beta,7alpha)-7-甲氧基豆甾-5-烯-3-酮 256445-68-8 C30H52O2 ≥95%

靛藍(lán)Indigo20mg/支

常春藤苷D;常春藤甙D Hederacoside D 760961-03-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

中藥對(duì)照藥材甘青青蘭121529-200501TLC法鑒別

SHATAVARIN IV ;Asparanin B 天冬寧B 純度：>95%

產(chǎn)品名稱：磷酸酶抑制劑混合物5ml使用說(shuō)明書
儲(chǔ)存條件：2-8℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

組織細(xì)胞裂解過(guò)程中釋放大量?jī)?nèi)源性蛋白磷酸酶，以各種方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化。本蛋白磷酸酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白磷酸酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白磷酸酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以強(qiáng)烈?guī)缀跛兄匾牡鞍琢姿崦富钚?，包括蛋白絲/*磷酸酶、蛋白*磷酸酶、堿性磷酸酶、酸性磷酸酶等。該混合物為100倍濃縮水溶液，可用于直接加入任何組織類型和細(xì)胞的裂解產(chǎn)物中，均能有效抑制磷酸化蛋白質(zhì)的去磷酸化

磷酸酶抑制劑混合物5ml使用說(shuō)明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
磷酸酶抑制劑混合物5ml使用說(shuō)明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
磷酸酶抑制劑混合物5ml使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
1731-86-8 十一烷酸甲酯(C11:0) 標(biāo)準(zhǔn)品(N/A) 1g

屈菜Chelidonium majus L. 乙氧基屈菜紅減 79559-55-0 C23H23NO5 ≥98% 十六醇，鯨蠟醇0 68-500

對(duì)照品*龍100153-199603含量測(cè)定

*標(biāo)準(zhǔn)品20mg*標(biāo)準(zhǔn)品

桃 Prunus persica (L.) Batsch Amygdalin 苦杏仁甙 29883-15-6 C20H27 ≥98%
104376-79-6 *鈉雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品(+4℃) 10mg

柚Citrus maxima 香柑醇 486-60-2 C11H6O4 ≥97% 芹菜素-7-葡萄糖苷0 8 0

噻節(jié)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 樂(lè)果標(biāo)準(zhǔn)品 烯酰嗎啉標(biāo)準(zhǔn)品

Fospxenytoin wo7ium 本妥英鈉標(biāo)準(zhǔn)品92134-98-0 250mg本妥英鈉標(biāo)準(zhǔn)品

大黃酚-8-O-葡萄糖苷 13241-28-6 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
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