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更新時(shí)間:2017-07-04 14:25:15瀏覽次數(shù):139次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
蛋白酶抑制劑混合物(細(xì)菌蛋白提?。?/span>1ml使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:蛋白酶抑制劑混合物(細(xì)菌蛋白提?。?/span>1ml使用說明書
儲存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
本蛋白酶抑制劑混合物包含5種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
此抑制劑混合物為100 倍濃縮DMSO 溶液,適用于從細(xì)菌中提取蛋白,直接加入任何類型的細(xì)菌裂解產(chǎn)物中,均能有效抑制蛋白酶的活性,更高效的提取目的蛋白。適用于Western Blot 和免疫共沉淀等。
蛋白酶抑制劑混合物(細(xì)菌蛋白提取)1ml使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶抑制劑混合物(細(xì)菌蛋白提取)1ml使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. Schisandrin A 五味子甲素 61281-38-7 C24H32O6 ≥98%
貝母速PqimininqHPLC≥98%,20mg/支
蟾毒靈;蟾酥靈 Bufalin 465-21-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
UV含量測定托芬那酸100690-200401常溫,避光100mg
Poloxamer Solid 泊洛沙姆固體標(biāo)準(zhǔn)品9003-11-61g
1693-37-4 N-乙酰對安基酚相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 30mg
黃皮Clausena lansium 雙丙同安草酸鹽 625-04-7 C6H13NO ≥95% CORYNANTHINE(RAUHIMBINE(RG0 812-025
對照品*100071-199905含量測定
Estradiol Cypionate環(huán)戊丙酸雌二醇標(biāo)準(zhǔn)品313-06-4200mg環(huán)戊丙酸雌二醇標(biāo)準(zhǔn)品
紫莖澤蘭Eupatorium adenophorum 3-Acetoxy-4,7(11)-cadinadien
姜黃 Curcuma longa L. Tetraxy7nocucumin 四氫姜黃素 36062-04-1 C21H24O6 ≥98%
柚皮速-7-O-葡萄糖醛醋苷Ncringqnin-7-O-glucuronidq20mg
馬兜鈴酸B;馬兜鈴酸II Aristolochic Acid B 313-67-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品N-氧化*130522-200301系統(tǒng)適應(yīng)性
靈芝酸D Ganoderic acid D 108340-60-9 20mg HPLC≥98% 本品用于含量測定
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞色素P450(CYP450)免疫試劑盒 Human Cytochrome P450 ELISA kit
ATP含量測試盒 高效液相色譜法 50管/48樣
RatN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanhormonesensitivelipase,HSLELISA試劑盒人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/HLAⅠELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 人維生素K1(VK1)ELISA試劑盒
HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanComplementfragment3a,C3aELISA試劑盒人補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CaMKII激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanP-Selectin/CD62P/GMP140ELISAKit人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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