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更新時(shí)間:2017-07-04 14:22:43瀏覽次數(shù):144次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:酵母蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T免費(fèi)代測(cè)
儲(chǔ)存條件: 蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液室溫保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
酵母蛋白提取試劑盒適用于從各種酵母樣本中高效而溫和地抽提可溶性總蛋白。提取過程簡單方便,避免了重復(fù)性差的研磨法,超聲波法或壓榨法對(duì)酵母細(xì)胞的破壞,避免激烈的機(jī)械處理造成的氧化和熱度升高對(duì)目的蛋白的破壞作用??稍?/span>1小時(shí)內(nèi)完成。
該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。 提取的蛋白直接用于等點(diǎn)聚焦電泳、雙向電泳。
酵母蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
酵母蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
酵母蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
四葉蘿芙木Rauvolfia tetraphylla Sarpagine 薩杷晉堿 482-68-8 C19H22N2O2 ≥97%
升麻速苷Prim-o-glucosylcimifugin20mg/支
柴胡皂苷D;柴胡皂甙D Saikosaponin D 20874-52-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材白薇121518-200501TLC法鑒別
HARMALINE HCL 駱駝蓬堿純度:>95%
16590-41-3 鈉曲酮標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
紅鏈霉速-龍膽二糖苷Redgentianglycosidestreptomycin-two
1-xy7noxy-2-oxopoMolic acid 1-輕基-2-氧代果樹酸 217466-37-0
雙氫鏈霉索 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào): 5490-27-7 10ml
二氫楊梅素;Dixy7nomyricet 27200-12-0 20mg 訂購|咨詢
*S Rifamycin S 100mg
右旋奎寧醋inoneicccid77-92-≥98%,20mg/vial
澤瀉醇B-23-醋酸酯;澤瀉醇B醋酸酯;23-乙酰澤瀉醇 Alisol B 23-acetate 26575-95-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
對(duì)照品1205-200203含量測(cè)定
甲基黃連堿 Worenine 38763-29-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
小鼠Gremlin小鼠1蛋白(GREM1)ELISA試劑盒 ,英文名: GREM1 ELISA Kit
人細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanextracellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 96T/48T
大鼠*S轉(zhuǎn)移酶P(GSTP1)免疫試劑盒 Rat Glutathione S-transferase P,GSTP1 ELISA kit
CLIAKitforVLAELISAKit大鼠遲現(xiàn)抗原規(guī)格:48T/96T
脈沖凝膠電泳DNA產(chǎn)物酶切試劑盒20次
ELISAKitMVIgG人麻疹病毒IgG規(guī)格:48T/96T
小鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat pepsin (Pepsin) ELISA Kit 大鼠*(Pepsin)ELISA試劑盒
Humancatecholamine,CAELISAKit 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanComplement1q,C1qELISA試劑盒人補(bǔ)體1q(C1q)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織a-*(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanpurkinjecellautoantibody,PCA-1/YoELISAKit人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酵母蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T免費(fèi)代測(cè)人鏈激酶(SK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人粒細(xì)胞特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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