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更新時(shí)間:2017-07-04 14:08:16瀏覽次數(shù):170次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:核蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
核蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動(dòng)物組織中提取核蛋白和胞漿蛋白。提取過程簡(jiǎn)單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。制備的核蛋白和胞漿蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀、酶活性測(cè)定等蛋白研究。
核蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
核蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說,也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
核蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
千金藤 Stephania japonica(Thunb.) Miers. L-Stepholidine 千金藤啶堿 16562-13-3 C19H21NO4 ≥98%
蝙蝠葛減Dcuricinq20mg/支
蝙蝠葛減;北豆根減;三豆根減 Dauricine 524-17-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材南沙參121499-200501TLC法鑒別
β-sitosterol-D-glucoside 谷甾醇-3-O-葡萄糖苷純度:>95%
15307-81-0 雙錄芬酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷;細(xì)葉遠(yuǎn)志皂甙Tenuifolin;tenuifolin0183-47-2HPLC≥98%,20mg/支
AkuaMMigine AKUAMMIGINE 642-17-1
Norethindrone *標(biāo)準(zhǔn)品68-22-4 200mg*標(biāo)準(zhǔn)品
正丁胺 109-73-9 HPLC≥98%;0.2mL 訂購(gòu)|咨詢
半枝蓮堿 Scutebarbatine A 分 子 量:0.0000 編號(hào):176520-13-1 半枝蓮堿--(Scutebarbatine A)的詳細(xì)信息 物理化學(xué)性質(zhì): 危險(xiǎn)性質(zhì):
羽葉頭樹Garuga pinnata Reynoutrin 槲皮素-3-D-木糖甙 549-32-6 C20H18O11 模擬天然水銅溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)-銅080 96
熔點(diǎn)對(duì)照品*(熔點(diǎn)263℃)100102-199404常溫,避光1g
癸扶*標(biāo)準(zhǔn)品5002-47-1 500mg
狼牙刺Sophora viciifolia Lupalbigenin none 76754-24-0 C25H26O5 ≥98%
大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1癌基因伴侶(FGFR1OP)免疫試劑盒 Human FGFR1 oncogene partner,FGFR1OP ELISA kit
蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/24樣
Ratmyeloperoxidase,MPOELISA試劑盒大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanhepatitisEvirusIgG,HEV-IgGELISA試劑盒人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlupusanticoagulant,LAC/LAELISAKit人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit 人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanc-junELISA試劑盒人c-junELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1(LYSINESPECIFICDEMETHYLASE-1;LSD-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
HumanRotavirus,RVIgMELISAKit人輪狀病毒(RV)IgMELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
核蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)人羥脯酸(Hyp)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人前胰淀粉樣蛋白(proIAPP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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