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更新時間:2017-07-03 14:16:04瀏覽次數(shù):128次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)RB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒1000T免費代測儲存條件: 2-8℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
SRB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒是一種替代MTT法的細胞活性檢測方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結合,在490nm~520nm波長處其OD值與活細胞數(shù)成良好的直線關系。在515nm的OD讀數(shù),可用做細胞數(shù)的定量。
RB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒1000T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
RB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒1000T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
決明Cassia tora Robtin 刺槐雙氫黃酮 4382-34-7 C15H12O6 ≥97%
白當歸腦WhitqcngqliccbrcinHPLC≥98%;20mg/支
花前胡丁素 Praeruptorin D 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定*100646-200401常溫,避光100mg
雌二醇相關物質(zhì)C標準品571-92-615mg
14599-46-3 曲扶胸苷相關物質(zhì)A標準品 20mg
非洲馬鈴果Voacanga africana 榴花減 76-98-2 C23H30N2O4 ≥95% 言酸利多卡應(L0600000
本氧喹林(喹氧靈 本氧危標準品 本氧乙醇標準品
Carboplatin*標準品41575-94-4100mg*標準品
α-倒捻子素 :6147-11-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
*Tripterygium wilfordii Hook. f. Triptolide, 14-deoxy-14-oxo *內(nèi)酯酮 38647-11-9 C20H22O6 ≥98%
原花青速B2ProcycnidinB29106-49-820mg
牛蒡子苷元;牛蒡苷元;牛蒡甙元 Arctigenin 7770-78-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定地錄雷他定100919-200701常溫,避光100mg
α-常春藤苷;α-常春藤素 α-hederin 35790-95-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
新生牛血清shēng huà shì jì容量:RT5克
石油醚 90-100℃NA
3-基-1-丙醇,英文名或英文縮寫:3-Ami-propanol,級別:BR,5%,規(guī)格:0.25毫升
(生物級) Cycloheximide (Biotechnology Certified) 66-81-9 100MG 通用試劑
金絲/金/金海綿/金海棉/Gold 4N,0.2㎜ 1克 國產(chǎn)/進口
3-硝基本,英文名或英文縮寫:3-nitnoaniline,級別:高純,75%,規(guī)格:25毫克
CYTIDINE胞嘧啶核苷超純級白色粉末RTsigma
N,N,N,N,N-五基二烯基三安 Pqntcmqthyldiqthylqnqtricminq 3030-47-2
原花青素B2/原矢車菊素B2/Procyanidin B2 分析標準品,95% 20毫克 國產(chǎn)/進口
鎘/鎘粉/Cadmium AR,99.8%, 250克 國產(chǎn)
RB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒1000T免費代測3-O-metxylglucose3-O-甲基-D-葡萄糖1克BR,兔肝提取
147127-20-6*酯Tenofovir
3-Bromothiopxene-2-boronic acid 162607-26-3
乙基苯基硫 Ethyl Phenyl Sulfide,98% 622-38-8 5G 表面活性劑
N-酰神經(jīng)安醋 (-20℃) Nc
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