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更新時間:2017-07-03 14:15:23瀏覽次數(shù):352次
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XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T使用說明書儲存條件: 2-8℃避光保存。*存放-20℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒是應用二甲氧唑黃2,3-bis[2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl]-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazoliumhydroxide快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產(chǎn)品。XTT在電子耦合試劑存在的情況下能夠被線粒體內(nèi)的一些與輔酶Ⅱ相關的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與活細胞數(shù)量成正比。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數(shù)量呈線性關系。
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
望江南Cassia occidentalis Robtein 2',3,4,4',5-五羥基查耳酮 2679-65-4 C15H12O6 ≥95%
新*二輕查爾同Nqwhqspqridinchclconqtwoxy7nogqnHPLC≥98%;20mg/支
花前胡丙素 Praeruptorin C 83382-71-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材蒲葵子121479-200501TLC法鑒別
WITHANOLIDE B 睡茄素B純度:>95%
14599-46-3 曲扶胸苷相關物質(zhì)A標準品 10mg
扇開狗牙花Ervatamia flabelliformis 長春減衍生物 142741-24-0 C44H50N4O10 ≥96% 言酸凱托米同 - 對照譜圖(Y0000246
本氧丙酸標準品 本同坐標準品 本酰菌安(草酰安
西替利嗪相關物質(zhì)A標準品246870-46-220mg
亞麻木酚素 148244-82-0 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
米諾環(huán)素 Minocycline 100mg
原花青速B2ProcycnidinB29106-49-8HPLC≥98%,5mg/vial
*;3α,7β-二輕基-5β-膽甾烷-24-酸; *; 豬脫氧膽酸; 異去... Hyodeoxycholic acid 83-49-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測定,藥理科研
對照品*1220-9201含量測定
京尼平苷酸;梔子酸 Geniposidic acid 27741-01-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
新銅鐵試劑;N-亞肖基胲銨;α-基亞肖基羌安銨鹽 Nqocupfqrron;N-xy7noxy-N-nitnoso-1-ncphthylcMinq cMMoniuM sclt 1013-0-3
potewwiumfluoaluminate扶化鋁鉀100克BR,97%
鄰本二酰亞安鉀 Potcssium phthclimidq 1074-8-4
隱色結(jié)晶紫/無色結(jié)晶紫/隱性結(jié)晶紫/LCV BR,99%, 5克 國產(chǎn)
鈣試劑 AR,99% 25克 國產(chǎn)/進口
3-硝基shēng huà shì jì容量:RT100克
3132-99-83-溴97%3-Bromo
液體改良馬丁培養(yǎng)基(含瓊脂)40克RT
正忻醇 1-Octcnol rqcgqntplus 111-87-2
mTSB肉湯25克
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T使用說明書鈦鐵試劑shēng huà shì jì容量:RT,避光10克
6104-58-1亮藍Acid Blue 90
玉米粉瓊脂shēng huà shì jì容量:2~8℃100毫升
乙基丙烯醚,順反異... Ethyl-1-propenyl , mixture of cis... 928-55-2 5G 通用試劑
隊本二加醋二酯 Diqthyl p-phthclctq;qthyl tqrqphthclctq 636-09-9
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