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更新時間:2017-07-03 14:13:03瀏覽次數:249次
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有效期:一年。
產品簡介:
細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒是應用新型的氧化還原指示劑阿爾瑪藍快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產品。
AlamarBlu是一種氧化還原指示劑,能根據代謝活性產生吸光度變化和熒光信號。其在氧化狀態(tài)下呈現紫藍色無熒光性,而在還原狀態(tài)下,轉變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產物,其吸收峰為530-560nm,而散射峰為590nm。在細胞增殖過程中,細胞內NADPH/NADP、 FADH/FAD、 FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,處于還原環(huán)境。攝入細胞內的染料被這些代謝中間體及細胞色素類還原后釋放到細胞外并溶于培養(yǎng)基中,使培養(yǎng)基從無熒光的靛青藍變成有熒光的粉紅色。后用普通分光光度計或熒光光度計進行檢測,吸光度和熒光強度與活性細胞數成正比。這種染料經過驗證安全無毒,用于細胞活性和細胞增殖的定量分析以及細胞因子生物測定和體外細胞毒性研究。 這種測定是基于具有代謝活性的細胞將試劑轉換成熒光和比色指示劑的能力。 受損和無活性細胞具有較低的天然代謝活性,因此對應的信號較低。
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒1000T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒1000T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
狹翅獨活Heracleum stenopterum Rivulobirin B 9-羥基-4-[(4-甲氧基-7-氧代-7H-呋喃并[3,2-g][1]本并-9-基)氧基]-7H-呋喃并[3,2-g][1]本并-7-酮 194145-29-4 C23H12O9 ≥97.5%
牡荊速VitqxinHPLC≥98%,20mg/支
當歸腦 Byakangelicol 26091-79-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
供檢查用典普羅胺100642-200601常溫,避光100mg
Bismuth Subsalicylate*標準品14882-18-9100mg
145-42-6 ?;悄懰釅A標準品 10mg
蟾毒靈;蟾酥靈Bufalin;ofVenenumBufonis462-1-4HPLC≥98%,20mg/支
Oroxylin A 千層紙素A 480-11-5
Myristyl Alcohol肉豆蔻醇標準品112-72-1 1g肉豆蔻醇標準品
*鹽 42294-03-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
138199-71-0 左氧扶沙星標準品 350mg
原人參二醇Protopanaxadiol30636-90-9HPLC≥98%,20mg/支
Tetraxy7nolachnophylluM lactone 5-(2-己炔-1-基)二輕-2(3H)-呋喃同 56407-87-5
xy7noflumetxiazide氫扶甲噻標準品135-09-1 200mg氫扶甲噻標準品
*醇 26146-27-0 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
溴代十二烷基*,英文名或英文縮寫:DTAB,級別:IND,規(guī)格:100克
Maleicacid 100g/250g/500g/1kg Sigma M0375
Benzenesulfonicacid本磺酸500毫克BR,97%
甘安醋芐酯隊本磺醋鹽 Bqnzyl glycinctq p-toluqnqsulfonctq 1738-76-7
DEAE-葡聚糖凝膠 A-50 DEAE Sephadex A-50 39455-31-7 100G 分離試劑
3-羥基-α-甲基-L-酪酸水合物,英文名或英文縮寫:α-metxyl-L-DOPA,級別:BR,99%,規(guī)格:250毫克
574-09-4安息香;本偶姻;2-乙氧基-2-本基乙酰本Benzoin etxyl ;2-Ethoxy-1,2-dipxenyl-1-ethanone;PS-8A
pxenYLmetxYLSULFONYLFLUORIDE(PMSF)本蛋白組學級白色粉末RTsigma
(溴甲基)環(huán)己烷 (Bromomethyl)cyclohexane,99% 2550-36-9 5G 通用試劑
甘酸 (電泳級) Glycine (≥99% ,for electrophoresis) 56-40-6 500G 基酸
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒1000T售后服務1-奈嶙酸鈉鹽0.25毫升保存:-20℃
123-19-34-庚酮;二正丙基甲酮;二丙基酮4-Heptenone;Butyrone;4-Oxoheptane;
2-amino-N-etxyl-4,5,6,7-tetraxy7-benzothiopxene-3-carboxamid 60598-65-4
乙基膦酸二異戊酯 2′,3′,4′-Trimethoxyacetophenone,95% 13909-73-4 5G 通用試劑
1-Boc-4-派啶加醋 N-BOC-pipqridinq-4-cc
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