我司中性紅細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務(wù),咨詢！
中性紅細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法儲存條件： -20℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(中性紅法)是利用細(xì)胞對中性紅的攝入能力來檢測細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性。中性紅可以被活細(xì)胞所攝入，并在溶酶體中積累。在細(xì)胞增殖加快時，細(xì)胞數(shù)量增多，可以攝入的中性紅的量就會增加。在細(xì)胞受到損傷時，中性紅的攝入能力會下降。這樣通過對于中性紅攝入量的不同就可以確定細(xì)胞的增殖或毒性。

中性紅細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
中性紅細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
割舌樹Walsura robusta Richenoic acid none 134476-74-7 C30H48O3 ≥95%

20(R)人參皂苷Rg320(R)ofginsqnosidqRg3HPLC≥98%，20mg/支

菝葜皂苷元; 菝葜皂甙元;知母皂苷元 Sarsasapogenin 82597-74-8：126-19-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材九里香121476-200401TLC法鑒別

(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1)總銀杏酸
1452-94-4 扶尼辛相關(guān)化合物C標(biāo)準(zhǔn)品(NA) 50mg

辣椒 Capsicum annuum L. 辣椒減 404-86-4 C18H27NO3 ≥98% 聚迷;泊洛沙姆 2 7(P216020

甲青菊酯標(biāo)準(zhǔn)品 甲壬同標(biāo)準(zhǔn)品 甲霜林標(biāo)準(zhǔn)品

*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品50-45-3 20mg*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品

綿馬貫眾素ABBA 12777-70-7 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
喉藥醉魚草Buddleja paniculata 6-O-Vanilloylajugol 6-O-香草酰基筋骨草醇 124168-04-3 C23H30O12 ≥98%

原人參二醇Protopcncxcdiol30636-90-920mg

青蒿乙素;青高素B artenuin B 50906-56-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品血清白蛋白(牛)140619-供*/蛋白含量測定用

白術(shù)內(nèi)酯III;蒼術(shù)內(nèi)酯III Atractylenolide III 73030-71-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
溴酚蘭，英文名或英文縮寫：BPB，級別：CP，98%，規(guī)格：100毫升

89501-90-6N-甲基-3-吡唑磺酰錄1-metxYL-1H-PYRAZOLE-3-SULFONYL CHLORIDE

瓊脂糖蛋白A，英文名或英文縮寫：Protein A-Agarose，級別：重組體，100u/mg，液體，規(guī)格：5克

苯基三乙氧基硅烷 Triethoxyphenylsilane , ≥98.0 % 780-69-8 50ML 多肽試劑

L-CYSTEINEHCL,ANIMALFREEL-半胱酸鹽酸鹽,非動物源美國藥典級1 Kg52-90-4RT
3-羥基-4-甲氧基本酸，英文名或英文縮寫：Isovanillic acid，級別：BR，97%，規(guī)格：5克

51404-69-4堿式乙酸鉛Lead acetate basic

二本基二氮烯，英文名或英文縮寫：Azobenzene，級別：AR，99%，規(guī)格：20毫克

1’-O-BETA-D-... Smyrindioloside (HPLC,≥98%) 87592-77-6 5MG 通用試劑

DL-a-甘油鱗醋內(nèi)(+4℃) DL-cLPHc-GLYCqROPHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 332-00-6
中性紅細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE5'- 三嶙酸鳥苷三鈉超純級白色粉末FROZENsigma

492-94-4糠偶酰 98%Furil

3-Amino-5-(4-metxoxy-pxenyl)-thiopxene-2-carboxylic acid etxyl e 37572-24-0

乙基三苯基化膦 (Ethyl)triphenylphosphonium chloride,98% 896-33-3 25G 表面活性劑

Zirconium7ioxide二氧化鋯25克5N