當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞凋亡檢測>> Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說明書
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更新時間:2017-07-03 13:56:33瀏覽次數(shù):350次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說明書
儲存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
Ac-DEVD-CHO是一種高效可逆的caspase-3的小分子抑制劑,Ki值分別是0.23。可以抑制由Caspase3激活導(dǎo)致的細胞凋亡。Ac-DEVD-CHO分子式為N-Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-CHO,即C20H30N4O11,分子量為502.5。也可以抑制Caspase7。
Ac-DEVD-CHO 采用進口高品質(zhì)原料分裝配制。濃度為10mM。本產(chǎn)品適用于需要用到Ac-DEVD-CHO 的各種實驗,請根據(jù)不同的實驗需要進行配制和使用,具體請參考相關(guān)文獻或?qū)嶒炛改稀?/span>
Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
小葉藤黃Garcinia cowa Nigrolineaxanthone V 7,12-二羥基-9-甲氧基-2,2-二甲基-10-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-2H,6H-并[3,2-B]氧雜 864516-31-4 C24H24O6 ≥90%
植醋內(nèi)wo7iumphytctq14306-2-325mg
米仔蘭Aglaia odorata 5,7,4'-Tri-O-metxylaromad none 76792-94-4 C18H18O6 單元素錳溶液成分分析標準物質(zhì)080600
檢查用錄氮平100323-200201常溫,避光100mg
非諾多泮相關(guān)物質(zhì)B標準品20mg
10043-35-3 硼酸標準品 1g
表告依春Epigoitrin107-93-120mg
Cephalocyclidin A CEPHALOCYCLIDIN A 421583-14-4
*有關(guān)物質(zhì)C標準品27387-31-1 30mg*有關(guān)物質(zhì)C標準品
*B;cucurbitacin B 6199-67-3 20mg 訂購|咨詢
嬰粟殼 Opium poppy shell 1g
紫蘇子隊照藥材Perillacontrolmedicine1g
Luteolin 木犀草素 491-70-3
Tartaric Acid 標準品87-69-4 1g標準品
鹽酸益母草堿;Leonurine hyd 24697-74-3 20mg 訂購|咨詢
11(R)-HEDE (100 ug) 11R-xy7noxy-12E,14Z-eicosadienoic acid; 11(R)-HEDE
Hexanoyl Glycine (100 mg) NSC 224460; N-1-oxohexyl-glycine
iFluor 750-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 750-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Myristoyl Ethanolamide (100 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-tetradec*; AM 3165|Comperlan MM|Schercomid MME; Myristoyl Ethanolamide
11(Z),14(Z),17(Z)-Eicosatrienoic Acid (100 mg) 11Z,14Z,17Z-eicosatrienoic acid; 11(Z),14(Z),17(Z)-Eicosatrienoic Acid
(3S, Ryanodine
gp100 (457-466)Leu-Leu-Asp-Gly-Thr-Ala-Thr-Leu-Arg-Leu
α-Conotoxin GSAla-Cys-Ser-Gly-Arg-Gly-Ser-Arg-Cys-Hyp-Hyp-Gln-Cys-Cys-Met-Gly-Leu-Arg-Cys-Gly-Arg-Gly-Asn-Pro-Gln-Lys-Cys-Ile-Gly-Ala-His-Gla-Asp-Val
[Met5,Arg6,Phe7] EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Phe
Biotin-LC-KemptideBiotin-LC-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly
p3K, (Lys 58 Lys 60 Lys 63) Ea(52–68)Ala-Ser-Phe-Glu-Ala-Gln-Lys-Ala-Lys-Ala-Asn-Lys-Ala-Val-Asp-Lys-Ala
Caspase-3抑制劑 Ac-DEVD-CHO200ul使用說明書二乙胺DietxylamineCP500mL
CA1341B-100*1g瓊脂糖9012-36-6100*1g0
A5253-25GAlbumin Egg 卵清蛋白(雞)9006-59-125g
環(huán)境水樣DNA提取試劑盒50T
L-Asparagine, Anxy7nous100g
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