Rhodamine 123染色試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：Rhodamine 123染色試劑盒100T實驗方法
儲存條件：2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期： 六個月。

產(chǎn)品簡介：

Rhodamine123染色液可用于細胞凋亡檢測，Rhodamine123是一種細胞通透性的、陽離子的熒光探針，容易被有活性的線粒體攝取，沒有細胞毒性，Rhodamine123由于帶陽離子所以當線粒體膜電位存在的時候就會透過細胞膜在活細胞的線粒體內(nèi)聚集，發(fā)出黃綠色熒光，而當膜電位下降的時候，聚集的Rhodamine123就減少，從而發(fā)光強度降低。Rhodamine123常與Cy5和AMCA(AminomethylcoumarinAcetate)等組合進行多色熒光分析,相互間無顏色交叉;分析細胞凋亡時,可用Rhodamine123來檢測線粒體的膜電位,而用NAO來檢測線粒體結(jié)構(gòu)的完整性。Rhodamine123，可用于對許多種細胞進行染色，包括植物細胞和細菌。由于細胞內(nèi)ATP的量與Rhodamine123的熒光強度之間有相關性，Rhodamine123也可應用于檢測細胞內(nèi)的ATP。

Rhodamine 123染色試劑盒100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Rhodamine 123染色試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
荔枝草 Salvia plebeia R.Br. Nepetin-7-glucoside 假荊芥屬苷 569-90-4 C22H22O12 ≥98%

芝麻林速Sqscmolin1926-7-820mg

水紅木Viburnum cylindricum 4',9,9'-Trixy7noxy-3'-metxoxy- 3,7'-epoxy-4,8'-oxyneolignan none 144881-21-0 C19H22O6 單元素鉛溶液成分分析標準物質(zhì)080581

檢查用*二硫化物10319-200602常溫，避光50mg

非索非那定相關物質(zhì)A標準品76811-98-8 25mg
100-00-5 對硝基錄本標準品 250mg

人參皂苷F1GinsenosideF123963-43-HPLC≥98%,20mg/支

Deacetylsalannin DEACETYLSALANNIN 1110-56-1

Triacetin 三醋精標準品102-76-1 1g三醋精標準品

尼替西農(nóng) 104206-65-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
71-00-1 L-組安酸標準品 200mg

紫菀同ShiononeHPLC≥98%,20mg/支

xy7noxytuberosone 輕基晚香玉同 95456-43-2

Albuterol*標準品18559-94-9200mg*標準品

白麻苷 18609-17-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
15（S）-HETrE （25 ug）     15S-xy7noxy-8Z，11Z，13E-eicosatrienoic acid； 15（S）-HETrE

Carprofen （500 mg）     Carprodyl|NSC 297935； 6-chloro-α-metxyl-9H-carbazole-2-acetic acid

iFluor 555-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     iFluor 555-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Prostaglandin E1 etxyl ester （500 ug）     11α，15S-dixy7noxy-9-oxo-prost-13E-en-1-oic acid， etxyl ester； Alprostadil etxyl ester|PGE1 etxyl ester； Prostaglandin E1 etxyl ester

13（Z）-Docosenoic Acid （50 mg）     13Z-docosenoic acid； Erucic Acid； 13（Z）-Docosenoic Acid

D-（     Chlorampxenicol
GM-CSFAsn-Ala-Ile-Gln-Glu-Ala-Arg-Arg-Leu-Leu-Asn-Leu-Ser-Arg-Asp

α-CGRP (30-37) (canine, mouse, rat)Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2

[Met2]-DeltorphinTyr-Met-Phe-His-Leu-Met-Asp-NH2

Biotin-Insulin Receptor (1142-1153), amideBiotin-Thr-Arg-Asp-Ile-Tyr-Glu-Thr-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Lys-NH2

Oxyntomodulin (human, mouse, rat)His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala
Rhodamine 123染色試劑盒100T實驗方法月桂酸Lauric acidCP250g

CA1091-25gN-乙酰-D-安基葡萄糖7512-17-625g0

F8630-1GFibrinogen 纖維蛋白原(牛血)9001-32-51g

Total RNA Kit100T

L-Arginine500g