當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測>> Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測
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更新時(shí)間:2017-07-03 13:53:27瀏覽次數(shù):134次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測
儲存條件:2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。
有效期: 一年。
產(chǎn)品簡介:
PI檢測試劑盒可用于細(xì)胞凋亡檢測,也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細(xì)胞儀檢測。PropidiumIodide是一種DNA結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和630nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無膜通透性,不能透過活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光,晚期凋亡細(xì)胞紅光加強(qiáng),壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。也可采用流式細(xì)胞儀利用細(xì)胞形態(tài)上的改變影響它們的光散射特性改變進(jìn)行分析,還可與RNaseA結(jié)合進(jìn)行細(xì)胞周期分析。
Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
青蘭 Dracocephalum integrifolium Bge Nepetin 6-甲氧基藤黃菌素 520-11-6 C16H12O7 ≥98%
棕櫚醋Pclmiticccid1927-10-320mg
割舌樹Walsura robusta 3,7,16-Trixy7noxystigmast-5-ene none 289056-24-2 C29H50O3 單元素釤溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080566
中藥對照藥材布渣葉121218-200503TLC法鑒別
Vanillin香蘭素 純度:≥98%
1,8—二羥基葸醌 1,8- twoxy7noxyanthrainoneone 117-10-2 50mg
蘋果醋Malicacid6912-12-720mg
Lophanthoidin F LOPHANTHOIDIN F 120462-46-6
芍藥內(nèi)酯苷39011-90-0Alibiflorin
蘇丹紅Ⅰ;Sudan I 842-07-9 20mg 訂購|咨詢
斑蝥PorphyrosciasdecursivaMiq. Norcantharidin * 5442--12-6 C8H8O4 ≥98%
紫菀同Shiononq10376-48-420mg
南美蟛蜞菊Wedelia trilobata ent-3β-Tigloyloxykaur-16-en-19-oic acid 3ALPHA-巴豆酰基氧基-等效-貝殼杉-16-烯酸 79406-09-0 C25H36O4 *(100 86
檢查用*100332-200001常溫,避光50mg
非那西汀熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品62-44-2 500mg
8(S)-HETrE (250 ug) 8S-xy7noxy-9E,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; 8(S)-HETrE
Carprofen (5 g) Carprodyl|NSC 297935; 6-chloro-α-metxyl-9H-carbazole-2-acetic acid
iFluor 532-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 532-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Prostaglandin E1 etxyl ester (5 mg) 11α,15S-dixy7noxy-9-oxo-prost-13E-en-1-oic acid, etxyl ester; Alprostadil etxyl ester|PGE1 etxyl ester; Prostaglandin E1 etxyl ester
13(Z)-Docosenoic Acid (250 mg) 13Z-docosenoic acid; Erucic Acid; 13(Z)-Docosenoic Acid
D-( Chlorampxenicol
GMAP (25-41), amideThr-Ile-Met-Glu-Phe-Leu-Ala-Phe-Leu-His-Leu-Lys-Glu-Ala-Gly-Ala-Leu-NH2
α-CGRP (29-37) (canine, mouse, rat)Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2
[Lys8]-Vasotocin (free acid)Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly (Disulfide bridge:Cys1-Cys6)
Biotin-Insulin Receptor (1142-1153)Biotin-Thr-Arg-Asp-Ile-Tyr-Glu-Thr-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Lys
Ovalbumin(257-264) antigen peptideSer-Ile-Ile-Asn-Phe-Glu-Lys-Leu
Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測四錄化錫Tin tetrachlorideAR500g
CA1101-100g乙酰水楊酸50-78-2100g0
F8630-250MGFibrinogen 纖維蛋白原(牛血)9001-32-5250mg
總RNA提取試劑盒50T
L-精安酸100g
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