當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞凋亡檢測>> Hoechst33342染色試劑盒100T使用說明書
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更新時間:2017-07-03 13:53:08瀏覽次數(shù):223次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Hoechst33342染色試劑盒100T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Hoechst33342染色試劑盒100T使用說明書儲存條件:HO33342液-20℃避光保存。B液2-8℃保存。
有效期: 一年。
產(chǎn)品簡介:
Hoechst33342染色試劑盒可用于細胞凋亡檢測,也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。Hoechst33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst33342能少許進入正常細胞膜,使其染上低藍色,而凋亡細胞的膜通透性增強,因此進入凋亡細胞中的Hoechst33342比正常細胞的多,熒光強度要比正常細胞中要高,此外,凋亡細胞的染色體DNA的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA結(jié)合,并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst33342排出到細胞外使之在細胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細胞的藍色熒光增強。Hoechst33342的大激發(fā)波長為346nm,大發(fā)射波長為460nm;Hoechst33342和雙鏈DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長為350nm,大發(fā)射波長為461nm。本Hoechst33342染色試劑盒可直接用于活細胞或組織的細胞核染色,也可用于固定細胞或組織的細胞核染色。
Hoechst33342染色試劑盒100T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
我司Hoechst33342染色試劑盒100T使用說明書本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
云南百部Stemona mairei Neotuberostemonone 新對葉百部酮堿 954379-68-1 C22H31NO6 ≥95%
醉椒速Kcwcin3122-48-420mg
鉤藤Uncaria sessilifructus 3,6,19-Trixy7noxy-23-oxo-12-ursen-28-oic acid 3,6,19-三輕基-23-氧代-12-烏蘇烯-28-酸 131984-82-2 C30H46O6 單元素砷溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080585
含量測定*10318-200602常溫,避光100mg
非索非那定相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品25mg
1,6-二氫-2-甲基-6-氧代-(3, 1,6- twoxy7nogen -2-metxyl -6-oxo(3, 30mg
橄欖苦苷Oleuropein3619-4-420mg
Vandrikidine VANDRIKIDINE 50656-92-3
*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品25mg*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
*;Guanine 73-40-5 50mg 訂購|咨詢
葡萄 Vitis vinifera L. Procyanidin B1 原花青素B1 20315-25-7 C30H26O12 ≥98%
紫菀同Shiononq20mg/支
突厥烯同;大馬同 Damascenone 23696-85-7 20mg HPLC≥98% 突厥烯同 23696-85-7
中藥對照藥材箭根薯121400-200401TLC法鑒別
Aglycone - F11人參苷元F11純度:≥97%
8(S)-HETrE (100 ug) 8S-xy7noxy-9E,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; 8(S)-HETrE
Carprofen (1 g) Carprodyl|NSC 297935; 6-chloro-α-metxyl-9H-carbazole-2-acetic acid
iFluor 514-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 514-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Prostaglandin E1 etxyl ester (10 mg) 11α,15S-dixy7noxy-9-oxo-prost-13E-en-1-oic acid, etxyl ester; Alprostadil etxyl ester|PGE1 etxyl ester; Prostaglandin E1 etxyl ester
13(Z)-Docosenoic Acid (100 mg) 13Z-docosenoic acid; Erucic Acid; 13(Z)-Docosenoic Acid
α-Carboxybenzylpenicillin diwo7ium salt Carbenicillin diwo7ium
GMAP (16-41), amideLeu-Gln-Ser-Glu-Asp-Lys-Ala-Ile-Arg-Thr-Ile-Met-Glu-Phe-Leu-Ala-Phe-Leu-His-Leu-Lys-Glu-Ala-Gly-Ala-Leu-NH2
α-CGRP (23-37) (human)Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2
[Lys8]-Conopressin SCys-Ile-Ile-Arg-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly-NH2(Disulfide bridge:Cys1-Cys6)
Biotin-IkB Inhibitor, amideBiotin-Asp-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Leu-Asp-Ser-Met-Lys-Asp-NH2
OVA(323-339)Ile-Ser-Gln-Ala-Val-His-Ala-Ala-His-Ala-Glu-Ile-Asn-Glu-Ala-Gly-Arg
Hoechst33342染色試劑盒100T使用說明書二異丙胺DiisopropylamineCP250ml
CA1111-5g酸性品紅3244-88-05g0
I5500-10MGInsulin 牛胰島素11070-73-810mg
Tissue RNA Kit100T
Lanthanum Acetate25g
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