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Hoechst33342/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測

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更新時(shí)間:2017-07-03 13:51:28瀏覽次數(shù):136次

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產(chǎn)品名稱:Hoechst33342/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測
儲存條件:A液和B-20℃避光保存。C2-8℃保存。

有效期: 一年。

產(chǎn)品簡介:

Hoechst33342/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是采用DNA探針雙染細(xì)胞核的方法檢測細(xì)胞的狀態(tài)。Hoechst33342染色液A可以透過正常細(xì)胞膜,而細(xì)胞凋亡后,細(xì)胞膜對Hoechst33342染色液A的通透性增加,PI染色液B不能透過細(xì)胞膜,對正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞不能染色,而對壞死細(xì)胞可以染色。用兩種染色液對細(xì)胞進(jìn)行雙染后,使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡即可對細(xì)胞狀態(tài)進(jìn)行檢測。在雙變量流式細(xì)胞儀的散點(diǎn)圖上,這三群細(xì)胞表現(xiàn)分別為:正常細(xì)胞為低藍(lán)色/低紅色(A+/B+),凋亡細(xì)胞為高藍(lán)色/低紅色(A++/B+),壞死細(xì)胞為低藍(lán)色/高紅色(A+/B++)。

Hoechst33342/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Hoechst33342/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Hoechst33342/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
1,3-0二加非??鼘幩?/span> 1,3-0 twocaffeoylinoneic acid 20mg

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5S-HETrE 250 ug     5S-xy7noxy-6E,8Z11Z-eicosatrienoic acid; 5S-HETrE

S-Ketoprofen 100 mg     S-2-3-benzoylpxenylPropionic Acid|Dexketoprofen; S-3-benzoyl-α-metxyl-benzeneacetic acid

iFluor 350-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     iFluor 350-streptavidin conjugate 1 mg/ml

α-Piperidinobutiopxenone xy7nochloride 5 mg     1-pxenyl-2-1-piperidinyl-1-butenone, monoxy7nochloride; α-Piperidinobutiopxenone xy7nochloride

Docosatrienoic Acid 100 mg     13Z16Z,19Z-docosatrienoic acid; Docosatrienoic Acid

D-     Ampicillin wo7ium
Glycoprotein Hormone a (32-46) amideCys-Phe-Ser-Arg-Ala-Tyr-Pro-Thr-Pro-Leu-Arg-Ser-Lys-Lys-Thr-NH2

α-Casein (90-95)Arg-Tyr-Leu-Gly-Tyr-Leu

[Lys8,Asn9] Neurotensin LANT-6 (8-13)Lys-Asn-Pro-Tyr-Ile-Leu

Biotin-Gastrin Releasing Peptide, humanBiotin-Val-Pro-Leu-Pro-Ala-Gly-Gly-Gly-Thr-Val-Leu-Thr-Lys-Met-Tyr-Pro-Arg-Gly-Asn-His-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2

OV-1, SheepLys-Asn-Leu-Arg-Arg-Ile-Ile-Arg-Lys-Ile-Ile-His-Ile-Ile-Lys-Lys-Tyr-Gly
Hoechst33342/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測1,1,2-三錄乙烷1,1,2-TrichloroethaneCP500mL

CA1141-5g吖啶黃素8048-52-05g0

L2646-5MGPHA-M (Phytohemagglutinin M) 植物血球凝聚集素M9008-97-35mg

拭子DNA提取試劑盒50T

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