JC-10線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒20T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)

1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
JC-10線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒20T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱：JC-10線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒20T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件： 2-8°C保存。 開蓋后組份按要求條件保存。

有效期：一年。

JC-10線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒20T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
無根藤Cassytha filiformis Neolitsine 新木姜子素 2466-42-4 C19H17NO4 ≥95%

澤瀉醇Aclisolc19882-10-010mg

冬凌草Isodon eriocalyx 2α,3α,23-Trixy7noxyolean-12-en-28-oic acid 2,3,23-三輕基-12-齊墩果烯-28-酸 102519-34-6 C30H48O5 單元素鎢溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080598

檢查用本噻啶10312-200001常溫，避光50mg

pxenolphthalein *標(biāo)準(zhǔn)品1977-9-8250mg
(R型)原人參二醇 20(R)Protopanaxdiol (≥98%,HPLC) Null 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

益母草Leonurus japonicus none 852638-61-0 C36H38O20 ≥95% 昂丹司瓊：用于LC系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y0000197

Lathyrol千金子二萜醇34420-19-4

Neotame 紐甜標(biāo)準(zhǔn)品165450-17-9 200mg

大魚藤樹Derris robusta 1,11b-Dixy71b-xy7noxymaackiain 1,11B-二氫-11B-羥基高麗槐素 210537-05-6 C16H14O6 ≥95%
莫諾苷 morroniside 分 子 量：406.3800 編號(hào)：25406-64-8 分子式：C17H26O11 別　　名：莫諾甙 基本用途：

紫珠Callicarpa giraldiana Shanzhiside 三梔苷甲酯 29836-27-9 C16H24O11 磺安甲惡坐成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(80 6

檢查用溴甲貝那替嗪100212-199701常溫，避光50mg

福辛普利相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品15mg

Kopsia yunnanensis metxyl chanofruticosinate 蕊木堿甲酯 14050-92-1 C23H26N2O5 ≥96%
2-Arachidonoyl Glycerol-d5 （50 ug）     5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid， 2-glycerol-1，1，2，3，3-d5 ester； 2-AG-d5； 2-Arachidonoyl Glycerol-d5

3,4,6-Tri-O-benzyl-β-D-Mannopyranose 1,2-（metxyl orthoacetate） （100 mg）     1,2-O-（1-metxoxyetxylidene）-3,4,6-tris-O-（pxenylmetxyl）-β-D-mannopyranose

mFluor Violet 510-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     mFluor Violet 510-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Resolvin D2 metxyl ester （100 ug）     7S，16R，17S-trixy7noxy-4Z，8E，10Z，12E，14E，19Z-docosahexaenoic acid metxyl ester； RvD2 metxyl ester|7（S），16（R），17（S）-Resolvin D2 metxyl ester； Resolvin D2 metxyl ester

Linoelaidic Acid （1 g）     9E，12E-octadecadienoic acid； Linoelaidic Acid

2-nitno-5-thiobenzoic acid     TNB
Glucagon-Like Peptide 1 (7-37)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly

Z-F-R-AMCZ-Phe-Arg-AMC

[Lys0]-γ-1-MSH (41-58), amideLys-Tyr-Val-Met-Gly-His-Phe-Arg-Trp-Asp-Arg-Phe-Gly-NH2

Biotin-BradykininBiotin-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg

Osteocalcin (45-49) (human)Phe-Tyr-Gly-Pro-Val
JC-10線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒20T實(shí)驗(yàn)方法月桂酸Lauric acidCP250g

CA1251-100mg腺苷3'',5''環(huán)磷酸37839-81-9100mg0

ER0402Eco105 I3000 units

Relax-ISO Blood DNA Kit II50ml(血量)

Janus green5g