注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：普羅威登斯菌通用試劑盒
產(chǎn)品分類：熒光定量PCR
貨號：CP101186
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

酞菁二鋰(>93.0%(N))質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(N)Dilithium Phthalocyanine  ELISAKitPEB1人空腸彎曲菌黏附蛋白規(guī)格：48T/96T  倉鼠鐵蛋白(FE)試劑盒 Hamster ferritin,FE ELISA kit

4-氨基鄰苯二甲腈(>98.0%(N))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)4-Aminophthalonitrile  小鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒 ，英文名： COL4α1 ELISA Kit  CLIAKitforRANKL(MousereceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand)ELISAKit小鼠核因子κB受體活化因子配基規(guī)格：48T/96T

二苯并-24-冠8-(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Dibenzo-24-crown 8-Ether  人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA檢測試劑盒HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit 96T/48T  石蠟切片游離膽毛地黃皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌(PAN)間接染色試劑盒10

N,N'-二芐基-4,13-二氮雜-18-冠6-(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)N,N'-Dibenzyl-4,13-diaza-18-crown 6-Ether  大鼠肥胖抑制素試劑盒 Rat Obestatin ELISA Kit  ELISAKitMPIF-1/CCL23人骨髓抑制因子1規(guī)格：48T/96T
胰島素(牛)INSULIN質(zhì)量規(guī)格：BR，27U/mg,進(jìn)分  犬生長激素(GH)試劑盒 Dog growth hormone,GH ELISA Kit  人纖溶酶原(Plg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-天門冬氨酸鉀L-Aspartate Potassium質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  英文名稱Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2ELISAKit人脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  豬極低密度脂蛋白(VLDL)試劑盒 Pig very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit

輔酶Q10,泛醌Coenzyme Q10,Ubiquinone質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  沉淀法去內(nèi)試劑盒20  HumanMaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISAkit 人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

輔酶Q10(標(biāo)準(zhǔn)品)Coenzyme Q10質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品  Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISA試劑盒人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
普羅威登斯菌通用試劑盒Carbonate Buffer（碳酸鹽緩沖液）

Millonig Phosphate Buffer

Triton Permeating Solution in PBS
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。