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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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恙蟲病東方體探針法熒光定量PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-08-16 15:40:16瀏覽次數(shù):202次

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恙蟲病東方體探針法熒光定量PCR試劑盒運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品特點:

高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:恙蟲病東方體探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光定量PCR
貨號:CP101076
產(chǎn)品規(guī)格:50
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年儲存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min
注意事項:
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,43,2。
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

托芬那酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定N-(3-Chloro-ortho-tolyl) anthranilic acid  大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA檢測試劑盒RatCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit 96T/48T  HumanInfluenzavirusesIgG,FLUELISA試劑盒人流感病毒抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

甲鈷胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定Mecobalamin  C多肽(CP)試劑盒 Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit  HumanMelanomaMarkerA,MA/Melan-AELISAKit人色素瘤標記物(MA/Melan-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

單白前苷B質(zhì)量規(guī)格:HPLC95%,標準品Vincetoxicoside B  英文名稱MouseGSH-PXELISAKit小鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)規(guī)格:96T/48T  大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI ELISA Kit

卡托普利二硫化物質(zhì)量規(guī)格:美國進口Captopril Disulfide  冰凍切片熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50  人型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA檢測試劑盒HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISAKit 96T/48T
油酸(標準品) Oleic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.0%(GC)  腸出血性大腸埃希菌(EerohaemorrhagicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20  Humanbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit 人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

反式-9-十八烯酸甲酯(標準品)trans-9-Octadecenoic methyl ester質(zhì)量規(guī)格:分析標準品  RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISA試劑盒人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

對位紅(標準品) Para Red質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,用于食品分析  小鼠組胺H4受體(HRH4)ELISA試劑盒 ,英文名: HRH4 ELISA Kit  組織樣品組織蛋白酶S(CATHEPSINS)活性熒光定量檢測試劑盒20

巖芹酸(標準品)Petroselinic acid質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,>99%(GC)  山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒GoatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T  Humangrowth-regulatedoncogeneα/melanomagrowthstimulatingactivity,GROα/MGSAELISAKit人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
恙蟲病東方體探針法熒光定量PCR試劑盒副溶血性弧菌恒溫熒光法檢測試劑盒

志賀氏菌恒溫熒光法檢測試劑盒

金黃色葡萄球菌恒溫熒光法檢測試劑盒


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