產(chǎn)品名稱：蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲(chǔ)液)操作步驟
英文名字：Protease Inhibitor Cocktail

背景知識(shí)

內(nèi)源蛋白的產(chǎn)生和降解一般都維持在一個(gè)平衡狀態(tài)，因此在穩(wěn)定的環(huán)境因素下細(xì)胞內(nèi)的蛋白含量是也是穩(wěn)定的。但是在體外研究中，蛋白合成過(guò)程終止，而降解大大增強(qiáng),從而影響蛋白得率。因此我們建議使用多種小分子組成的抑制劑混合物來(lái)抑制蛋白酶的功能，阻止蛋白降解情況的發(fā)生。
實(shí)驗(yàn)方法

應(yīng)用領(lǐng)域

蛋白純化，蛋白免疫印跡, 免疫(共)沉淀，蛋白質(zhì)pull-down實(shí)驗(yàn)，免疫熒光，免疫組織化學(xué)，激酶測(cè)定等。
使用方法

在室溫下溶解DMSO儲(chǔ)液， 在您的實(shí)驗(yàn)體系中，按照1：100的比率(體積比體積)將抑制劑cocktail加入到樣品溶液中(比如細(xì)胞裂解液或者組織抽提物)。

蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲(chǔ)液)操作步驟常見問(wèn)題：

問(wèn)題1: 為什么要用蛋白酶抑制劑Cocktail？
回答1: 蛋白酶抑制劑Cocktail是低毒，全面的蛋白保護(hù)試劑，Z大限度地保護(hù)蛋白，使其免于被蛋白酶降解。目前生物學(xué)研究日漸深入，更多地將目標(biāo)鎖定為細(xì)胞中較為微量的蛋白，如信號(hào)通路蛋白、受體蛋白，采用coIP,Pull-down等方法獲得樣品。對(duì)于這些微量的珍貴樣品，Cocktail能取得的保護(hù)效果，比單一的抑制劑（如PMSF）更為可靠。
問(wèn)題2: 蛋白酶抑制劑Cocktail能否稀釋使用？
回答2: 蛋白酶活性抑制效果和很多因素有關(guān)，如目標(biāo)蛋白降解的難易程度、蛋白酶的濃度、活性、抑制劑的濃度都會(huì)影響Z后的保護(hù)效果。我們的蛋白酶抑制劑Cocktail采用經(jīng)典濃度配比，確保對(duì)不同類型的蛋白酶都有充分的抑制效果。為了取得的保護(hù)效果，使用時(shí)應(yīng)按照規(guī)定比例稀釋，這是此類產(chǎn)品的共性。但實(shí)際產(chǎn)品里，不同廠商的標(biāo)示清楚程度不同，有些友商的對(duì)稀釋操作描述不嚴(yán)謹(jǐn)，很容易產(chǎn)生可以稀釋使用的誤導(dǎo)，需要仔細(xì)辨讀，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在部分實(shí)驗(yàn)室實(shí)際應(yīng)用中，也存在對(duì)于已知蛋白的成熟操作流程中減量使用cocktail的情況，對(duì)于這類應(yīng)用，Biotool可對(duì)照同類產(chǎn)品的相同比例稀釋使用，可以保證保護(hù)效果。
問(wèn)題3: 實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用PMSF來(lái)保護(hù)蛋白，蛋白酶抑制劑Cocktail和它比有什么優(yōu)勢(shì)？
回答3: PMSF是經(jīng)典的絲氨酸蛋白酶抑制劑，以前被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞裂解純化蛋白過(guò)程。但由于PMSF在很多方面存在明顯的缺點(diǎn)，逐步被保護(hù)效果更好，更安全的蛋白酶抑制劑Cocktail所取代。PMSF的毒性較高，因此在蛋白酶抑制劑中選用AEBSF作為其替代品。AEBSF的半致死量是2834mg/kg，而PMSF是200mg/kg，AEBSF安全域值超過(guò)PMSF十四倍多，同時(shí)有著相當(dāng)?shù)囊种菩Ч瑢?duì)于很多絲氨酸蛋白酶的抑制比PMSF更為迅速。PMSF的另一個(gè)缺點(diǎn)是易降解失效，它在水溶液中的半衰期是30min，在細(xì)胞裂解過(guò)程中很容易失效。而蛋白酶抑制劑Cocktail不但保護(hù)更加全面，而且效果更加持久。
問(wèn)題4: 我應(yīng)該選擇哪種類型的蛋白酶抑制劑cocktail， 片劑還是溶液？
回答4: 在選擇cocktail產(chǎn)品類型的時(shí)候我們需要注意一些細(xì)節(jié)問(wèn)題。兩種類型的產(chǎn)品都含有添加物。片劑中含有若干種公司的未經(jīng)公開的醫(yī)藥成分， 而溶液型產(chǎn)品中含有溶劑成分DMSO。一般來(lái)說(shuō)這些添加物是不會(huì)影響產(chǎn)品效果的。在工業(yè)生產(chǎn)中，溶液型產(chǎn)品較片劑來(lái)說(shuō)需要的加工步驟少，因而質(zhì)量好價(jià)格低。而片劑產(chǎn)品在儲(chǔ)存和運(yùn)輸兩個(gè)環(huán)節(jié)具有優(yōu)勢(shì)，片劑能夠在4度儲(chǔ)存而不需要零下20度。我們推薦使用溶液型產(chǎn)品，價(jià)格更低，有效的抑制劑成分含量更高，便于直接分裝。
問(wèn)題5: DMSO會(huì)不會(huì)對(duì)我的實(shí)驗(yàn)造成影響？
回答5: DMSO會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可能性很低。在生物科學(xué)領(lǐng)域DMSO被作為很多生物活性物質(zhì)的溶劑，比如蛋白結(jié)晶和免疫共沉淀等要求較高的實(shí)驗(yàn)體系中DMSO也有應(yīng)用。DMSO在室溫下性質(zhì)穩(wěn)定，在低溫條件下DMSO還是優(yōu)秀的細(xì)胞冷凍保護(hù)劑。
問(wèn)題6: 用了Cocktail，結(jié)果仍然不好是怎么回事？
回答6: 蛋白酶抑制劑Cocktail作用是保護(hù)蛋白免受蛋白酶降解威脅，提高蛋白得率。對(duì)于絕大多數(shù)蛋白，Cocktail都有很好的效果。如果還是出現(xiàn)蛋白得率低的情況，需要謹(jǐn)慎檢查實(shí)驗(yàn)步驟和方案設(shè)計(jì)，Z大限度發(fā)揮Cocktail作用，減少導(dǎo)致蛋白降解的環(huán)節(jié)。例如，細(xì)胞處理前，先要將裂解體系*準(zhǔn)備好，預(yù)先加入Cocktail并混勻，將要破碎的細(xì)胞，收集完后或從冰箱中取出后立即加入準(zhǔn)備好的裂解液中，給予蛋白全程保護(hù)。

蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲(chǔ)液)操作步驟儲(chǔ)存條件：
 大部分的試劑產(chǎn)品是比較穩(wěn)定的，只要您嚴(yán)格按照產(chǎn)品包裝或者說(shuō)明書上的儲(chǔ)存條件進(jìn)行儲(chǔ)存，*可以保證其在有效期內(nèi)的正常使用。一般常見儲(chǔ)存條件有零下XX攝氏度，2-8攝氏度，常溫等。特別提醒，對(duì)于某些酶類制品，如果儲(chǔ)存條件是2-8攝氏度，不要儲(chǔ)存在零下，否則容易失活，對(duì)于某些需要嚴(yán)格避光，防潮，充氮?dú)獗Ｗo(hù)的，接觸空氣或者過(guò)分暴露非常容易氧化或者受潮變質(zhì)。
低溫儲(chǔ)存產(chǎn)品，運(yùn)輸途中冷藏問(wèn)題：
 對(duì)于需要低溫儲(chǔ)存的產(chǎn)品，我們?cè)谶\(yùn)輸時(shí)候都會(huì)采用冷藏包裝，但是部分由于外界氣溫過(guò)高，運(yùn)輸時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)于普通冷藏包裝，途中可能會(huì)溫度升高，這些都是沒(méi)有問(wèn)題的，因?yàn)檫@種普通冷藏只適用于那些短期內(nèi)（2周）高溫依然穩(wěn)定的產(chǎn)品，建議低溫的儲(chǔ)存條件，只是長(zhǎng)期儲(chǔ)存時(shí)候的條件，您可以放心使用。對(duì)于某些特殊的產(chǎn)品，如抗體，我們會(huì)采用干冰冷藏包裝，確保全程低溫。公司都對(duì)產(chǎn)品性狀進(jìn)行了嚴(yán)格的加速穩(wěn)定測(cè)試，行業(yè)經(jīng)驗(yàn)豐富。
蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲(chǔ)液)操作步驟分裝及溶液配制：
 您收到貨物后不要自己進(jìn)行分包，因?yàn)榉职h(huán)境、包裝材料等因素可能導(dǎo)致分包后的產(chǎn)品變質(zhì)；如您有特殊包裝要求，請(qǐng)?jiān)谟嗁?gòu)時(shí)候與我們客服代表闡明，當(dāng)然價(jià)格會(huì)做適當(dāng)調(diào)整。對(duì)于開蓋后，長(zhǎng)期未使用的，請(qǐng)務(wù)必重新密封好，建議Parafilm封口膜，并按照相應(yīng)儲(chǔ)存條件使用。如果放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，超過(guò)產(chǎn)品有效期，建議您重新購(gòu)買，以免影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。
蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲(chǔ)液)操作步驟產(chǎn)品應(yīng)用：
 對(duì)于一些相對(duì)特殊的產(chǎn)品，我們會(huì)提供產(chǎn)品說(shuō)明書，里面會(huì)對(duì)產(chǎn)品溶解性，及我們所能了解的產(chǎn)品應(yīng)用信息，實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行描述，您可以作為參考。對(duì)于常見試劑，因?yàn)閼?yīng)用廣泛，一般不提供說(shuō)明書。如果您在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到了問(wèn)題，歡迎與我們討論，我們將盡力幫您解決。
蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲(chǔ)液)操作步驟儲(chǔ)存條件：避光、干燥陰涼處封閉貯存,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混放、混運(yùn)。本品為非危險(xiǎn) 產(chǎn)品可按一般化學(xué)品運(yùn)輸,輕搬動(dòng)輕放,防止日曬、雨淋！受熱、受潮、受光后易喪失活力,保存期短,因此貯存和運(yùn)輸條件比較苛刻。
therapeutic or diagnostic applications. 
產(chǎn)品介紹 The PAF receptor binds plaet-activating factor (PAF) and is thought to mediate its action via a G protein that activates a phosphatidylinositol-calcium second messenger system. PAF is a chemotactic phospholipid mediator that possesses potent inflammatory, smooth-muscle contractile and hypotensive activity. It has been implicated as a mediator in diverse pathologic processes, such as allergy, asthma, septic shock, arterial thrombosis, and inflammatory processes. 
The PAF receptor is induced by granulocyte macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), interleukin-5 and n-butyrate. A diverse range of compounds act as PAF receptor antagonists; these may be useful pharmacologically.
英文名稱  Anti-p58ipk/DNAJC3 
中文名稱  干擾素誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體 
別    名  DNAJC3; Protein Kinase Inhibitor P58; DnaJ homolog subfamily C member 3; HP58; Interferon induced, double stranded RNA activated protein kinase inhibitor; P58; p58 ipk ; P58IPK; PRKRI; Protein kinase inhibitor of 58 kDa; Protein kinase inhibitor p58. 
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg 
抗體來(lái)源  Rabbit  
克隆類型  polyclonal 
交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
產(chǎn)品類型  一抗    

500g    瓶    Yeast Extract 酵母膏
100g    瓶    (YNB)無(wú)氨基酸酵母氮源(含硫酸銨)
        堿基與核酸
5g    瓶    Alloxan Momohydrate 四氧嘧啶
1g    瓶    6-Benzyl Aminopurine 6-芐基氨基喋呤
5g    瓶    6-Benzyl Aminopurine 6-芐基氨基喋呤
5g    瓶    Adenosine 腺苷
1g    瓶    ATPNa2 三磷酸腺苷二鈉
5g    瓶    ATPNa2 三磷酸腺苷二鈉
500mg    支    ADPNa2 二磷酸腺苷二鈉
1g    瓶    ADPNa2 二磷酸腺苷二鈉
1g    瓶    AMPNa2 一磷酸腺苷二鈉
5g    瓶    AMPNa2 一磷酸腺苷二鈉
蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲(chǔ)液)操作步驟1vial    支    8-Azaguanine(原裝) 8－氮雜鳥嘌呤
5g    瓶    Adenine Sulfate 腺嘌呤硫酸鹽
10g    瓶    Adenine Sulfate 腺嘌呤硫酸鹽
5g    瓶    Adenine 腺嘌呤
10g    瓶    Adenine 腺嘌呤
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