當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養(yǎng)>>細胞培養(yǎng)、鑒定試劑盒>> T25m2小鼠直腸平滑肌細胞鑒定試劑盒直銷
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 小鼠直腸平滑肌細胞鑒定試劑盒直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963558 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1984/2/6 Prochlorperazine (maleate) 250mg Human Endogenous Retroviruses(HERV)人類內源性逆轉錄病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
1984/2/6 Prochlorperazine (maleate) 500mg Human Endogenous Retroviruses(HERV)人類內源性逆轉錄病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒(停) 動物病原微生物檢測(科研用)
1985/1/8 Phenanthrene 100mg Human Endogenous Retroviruses(HERV)人類內源性逆轉錄病毒RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
1985/1/8 Phenanthrene 10mM*1mLinDMSO Pasteurella multocida兔巴氏桿菌LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
1986/8/8 3-Acetylpyridine NAD 25mg Pasteurella multocida兔巴氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)
Parecoxib 198470-85-8 中文名:帕瑞考昔鈉 分子式:C19H17N2NaO4S 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISAKit ELISA. 96T/48T
p-Anisoin 119-52-8 中文名:對茴香偶姻 分子式:C16H16O4 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
p-Anisil 1226-42-2 中文名:茴香偶酰 分子式:C16H14O4 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Panaxyne 122855-49-6 中文名: 分子式:C14H20O2 度:97.0% 關鍵詞: 細胞毒活性; 聚乙炔; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Panaxydiol 63910-76-9 中文名: 分子式:C17H24O2 度:% 關鍵詞: 小鼠雄烯二(ASD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠直腸平滑肌細胞鑒定試劑盒直銷1001575-98-9 DCP-Rho1 1mg Nodus nelumbinis rhizomatis藕節(jié)探針法PCR鑒定試劑盒
1001575-98-9 DCP-Rho1 500μg Nodus nelumbinis rhizomatis藕節(jié)探針法PCR鑒定試劑盒
1001600-56-1 BV6 100mg Radix achyranthis bidentatae牛膝探針法PCR鑒定試劑盒
1001600-56-1 BV6 10mM(in1mLDMSO) Fructus ligustri lucidi女貞子探針法PCR鑒定試劑盒
1001600-56-1 BV6 25mg Radix achyranthis bidentatae牛膝探針法PCR鑒定試劑盒
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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