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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小雙節(jié)RNA病毒熒光PCR法檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-07-19 17:00:42瀏覽次數(shù):144次

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小雙節(jié)RNA病毒熒光PCR法檢測試劑盒運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:小雙節(jié)RNA病毒熒光PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
貨號:CP99322
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

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儲存條件:
14或-20樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min。
注意事項:
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
11029-12-2  Enocyanin  100mg  Epidermophyton floccosum絮狀表皮癬菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20

11029-12-2  Enocyanin  10mM*1mLinDMSO  Trichophyton rubrum紅色毛癬菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20

11029-61-1  Gramicidin A  1mg  Trichophyton rubrum紅色毛癬菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20

11029-61-1  Gramicidin A  5mg  Trichophyton mentagrophytes須毛癬菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20

110311-30-3  Amrubicin hydrochloride  1mg  Trichophyton mentagrophytes須毛癬菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20
溴百里酚藍鈉鹽Bromothymol blue  salt質(zhì)量規(guī)格:AR  大鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA檢測試劑盒RatypsinELISAKit 96T/48T  ELISAKitNSE兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶規(guī)格:48T/96T

特地唑胺游離堿Tedizolid free base質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR  人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)試劑盒 Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit  ChickenfactorB,BFELISAKitB因子(BF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

特地唑胺;特地唑胺1酸酯Tedizolid phosphate;TR-701FA質(zhì)量規(guī)格:>99%;BR  Ratmaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3-2-苯并噻唑酮腙鹽酸鹽,水合MBTH  hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR  DMDC500毫升  小鼠白介素6(IL-6)試劑盒 Mouse Ierleukin 6,IL-6 ELISA KIT
小雙節(jié)RNA病毒熒光PCR法檢測試劑盒CL-0364HuT 78(T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2梭菌蛋白酶質(zhì)量規(guī)格:酶活:>50U/mg,進分Clostripain

HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 人絨癌細胞VP16耐藥株TNFa轉(zhuǎn)染,JEG-3/VP16-TNFa細胞 7F2(小鼠雜交瘤細胞)2'-脫氧鳥苷-5'-1酸二鈉鹽(分子生物學(xué)級)質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate di salt

人肺癌細胞;A-427 [A427]三十二烷(standard for GC,98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,98.0%(GC)Dotriacontane

CD7 Others Mouse 小鼠 CD7 人細胞裂解液 (陽性對照) 正庚醇(Standard for GC,>99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.5%(GC)1-Heptanol

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293Tγ -丁內(nèi)酯(GBL(standard for GC,99.9%(GC))質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,99.9%(GC)4-Hydroxybutanoic acid lactone
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 76,5,4,32
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

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