當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T肺吸蟲熒光PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:肺吸蟲熒光PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
貨號:CP99475
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
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1092970-12-1 Morphothiadin (GLS4) 50mg Echinococcus granulosus細粒棘球絳蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1092970-12-1 Morphothiadin (GLS4) 5mg Human Immunodeficiency Virus 2(HIV-2)人免疫缺陷病毒II型A組前病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1092977-61-1 Evenamide 100mg Taenia saginata肥胖帶絳蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
鹽酸倍他司汀質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRBetahistine Di 大鼠堿性1酸酶(ALP)ELISA檢測試劑盒Ratalkalinephosphatase,ALPELISAKit 96T/48T Humanfarnesyl-diphosphatefarnesylansferase1,FDFT1ELISA試劑盒人法尼基二1酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸倍他司汀(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Betahistine Di 人β,β胡蘿卜素9',10'加氧酶(BCO2)試劑盒 Human BCO2 ELISA Kit humanImmunoglobulinE,IgEELISAKit人球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲磺酸倍他司汀質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBetahistine Dimesilate 英文名稱MouseCyclinD2ELISAKit小鼠細胞周期素D2(CyclinD2)規(guī)格:96T/48T 猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胰島素(豬)質(zhì)量規(guī)格:BR,來源豬胰臟INSULIN SDS蛋白酶DNA萃取試劑盒50 人氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)試劑盒 Human Peroxiredoxin 4,PRDX4 ELISA Kit
肺吸蟲熒光PCR法檢測試劑盒EJ(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2 肺大靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芍藥苷(50%)Paeoniflorin質(zhì)量規(guī)格:≥50%,BR
間充質(zhì)干細胞脂肪細胞分化培養(yǎng)基MADM-prf芍藥苷(90%)Paeoniflorin質(zhì)量規(guī)格:≥90%
CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5,6-二甲基-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))5,6-Dimethyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
大鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL2,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(HPLC)
CTLA4 Ig-24細胞,中國倉鼠卵巢細胞 SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌細胞) CM-H002人肺大動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL2,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
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