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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體熒光PCR法檢測(cè)試劑盒

嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體熒光PCR法檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-07-19 17:24:13瀏覽次數(shù):135次

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嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體熒光PCR法檢測(cè)試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門(mén)的區(qū)域操作。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體熒光PCR法檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
貨號(hào):CP99467
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

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儲(chǔ)存條件:
14或-20樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min。
注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
1093100-40-3  B-Raf inhibitor 1  10mg  Dhori Virus多里病毒RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1093100-40-3  B-Raf inhibitor 1  50mg  Xylella fastidiosa苛養(yǎng)木桿菌LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1093100-40-3  B-Raf inhibitor 1  5mg  Dhori Virus多里病毒RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1093108-50-9  BI-671800  100mg  Peste Des Petits Ruminants Virus(PPRV)小反芻獸疫病毒RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1093108-50-9  BI-671800  10mg  Eastern Equine Encephalomyelitis Virus(EEEV )東部馬腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20
鹽酸奧昔布寧(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Oxybutynin HCl  RatVitaminD,VDELISA試劑盒大鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  前膠原C端肽酶()ELISA試劑盒 ,英文名: ELISA Kit

鹽酸帕羅西汀質(zhì)量規(guī)格:>98%,半水合物Paroxetine HCl  小鼠固酮(ALD)ELISA試劑盒 ,英文名: ALD ELISA Kit  rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISA試劑盒兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

鹽酸帕羅西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Paroxetine HCl  小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 96T/48T  Humanai-ribonucleoproteinAibody,RNP-AbELISA試劑盒人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

吡羅昔康質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP gradePiroxicam  人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒 Human Calretinin,CR ELISA Kit  HumanCholicacid,CAELISAKit人膽酸(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體熒光PCR法檢測(cè)試劑盒EC109,人食管癌細(xì)胞美拉諾坦IIMTII質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMelanotan Acetate

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0926 人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL美洛昔康質(zhì)量規(guī)格:>99%Meloxicam

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]鹽酸吉西他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Gemcitabine HCl

IL23R Others Rat 大鼠 IL23R / IL23 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲磺酸吉米沙星質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRGemifioxacin Mesylate

肺大靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)甲磺酸吉米沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Gemifioxacin Mesylate
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

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