當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒熒光PCR法檢測試劑盒
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
?
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒熒光PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
貨號:CP99454
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
1093131-03-3 Veledimex S enantiomer (INXN-1001 S enantiome) 10mM*1mLinDMSO Enterovirus(EV)腸道病毒A組RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1093131-03-3 Veledimex S enantiomer (INXN-1001 S enantiome) 1mg Enterovirus(EV)腸道病毒A組RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1093131-03-3 Veledimex S enantiomer (INXN-1001 S enantiome) 5mg Cysticercus cellulosae豬囊尾蚴LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1093222-27-5 LKB1(AAK1 dual inhibitor) 10mg Enterovirus(EV)腸道病毒通用RT-LAMP試劑盒,停 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1093222-27-5 LKB1(AAK1 dual inhibitor) 200mg Rhipicentor spp.扇革蜱通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
鹽酸安他唑啉(標準品)Antazoline 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 化線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒100 HumanBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISAKit 人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
烏利司他Ulipristal質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Ratiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISA試劑盒大鼠細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISA試劑盒人孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸酚芐明(標準品)Phenoxybenzamine 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠載脂蛋白A1(Apo A1)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo A1 ELISA Kit ELISAKitMBP豬髓1脂堿性蛋白規(guī)格:48T/96T
丙那林(標準品)Clorprenaline 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 96T/48T HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit人(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒熒光PCR法檢測試劑盒EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY10221-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))1-Aminoanthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
CNE細胞,人鼻咽癌細胞 鼠骨髓瘤細胞,SP2/0-Ag14細胞 恒河猴皮膚細胞;RM-S19-溴蒽(>95.0%(GC))9-Bromoanthracene質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
NAMALWA(人Butt's瘤細胞) 5×106cells/瓶×22'-脫氧鳥苷-13C,15N22'-Deoxyguanosine-13C,15N2質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Promocell C-24110 Melanocyte Growth Medium KIT, 色素細胞生長培養(yǎng)基套裝 500mlO6-[4-)芐基]鳥嘌呤O6-[4-(Aminomethyl)benzyl]guanine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
色素細胞生長生長添加物MelGS阿糖鳥嘌呤水合物Ara-G hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。