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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>細(xì)胞,組織提取物>> T25m2人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞提取物說(shuō)明

人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞提取物說(shuō)明

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產(chǎn)品型號(hào)T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-06-21 09:21:26瀏覽次數(shù):119次

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人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞提取物說(shuō)明如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞提取物說(shuō)明

T25m2

CS-963975

人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞提取物【Human PlacentalNormal Placenta Trophoblast Cell Derivatives】人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞提取物是從人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞提取的,人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞從正常人胚胎滋養(yǎng)層組織制備。正常人胚胎滋養(yǎng)層組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mgRNA68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。

潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2  培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37,5%CO2  培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
117047-07-1  3&rsquo;-Methoxypuerarin  10mM*1mLinDMSO  Lassa Fever Virus(LASV)拉沙熱病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒 

117047-07-1  3&rsquo;-Methoxypuerarin  5mg  Acholeplasma laidlawii 萊氏無(wú)膽甾原體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 

117048-49-4  N-1-Fmoc-1,4-diaminobutane . HCl  1g  Lassa Fever Virus(LASV)拉沙熱病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒 

117048-49-4  N-1-Fmoc-1,4-diaminobutane . HCl  5g  Latino virus(LATV)拉蒂諾病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒 

117048-59-6  Combretastatin A4  10mg  Latino virus(LATV)拉蒂諾病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒
CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 達(dá)沙替尼羧酸Dasatinib Carboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFPN-去甲基加蘭他敏N-Desmethyl Galanthamine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5 I型膠原酶(100mL酶解緩沖液) 10mLO-去甲基加蘭他敏O-Desmethyl Galanthamine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

Saos-2,成骨肉瘤細(xì)胞 HumanO-去甲基加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

EM2 Others Mouse 小鼠 EM2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異吉非羅齊(吉非羅齊雜質(zhì))iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞提取物說(shuō)明表皮色素細(xì)胞-深色素總RNAHEM-d NAL-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:0.98L-Glutamic acid dimethyl ester

盤(pán)羊皮膚細(xì)胞;ASHS2 中國(guó)倉(cāng)鼠二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞,CHO/dhFr-細(xì)胞 Ca763細(xì)胞,615小鼠癌瘤株L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:0.98L-Leucine methyl ester

轉(zhuǎn)化細(xì)胞L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL-Phenylalanine methyl ester

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) KC-5103質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Tifluadom/KC-5103

CL-0322Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸伐昔洛韋/鹽酸萬(wàn)乃洛韋質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRValacyclovir HCl

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