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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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隱孢子蟲熒光PCR法檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-07-15 21:13:01瀏覽次數(shù):144次

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隱孢子蟲熒光PCR法檢測試劑盒運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴增。
其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93-94)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。

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具有下列特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。

產(chǎn)品名稱

隱孢子蟲熒光PCR法檢測試劑盒

規(guī)格

50T

貨號

CP99497

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

熒光定量PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

1092499-93-8  NVP-BSK805 2HCl  200mg  Caprine Herpesvirus 1(CpHV-1)山羊皰疹病毒1LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1092499-93-8  NVP-BSK805 2HCl  50mg  Caprine Herpesvirus 2(CpHV-2)山羊皰疹病毒2LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1092499-93-8  NVP-BSK805 2HCl  5mg  Brucella bovis牛布魯氏桿菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1092521-74-8  Farnesyl Thiosalicylic Acid Amide  10mg  Caprine Herpesvirus(CpHV)山羊皰疹病毒通用LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1092521-74-8  Farnesyl Thiosalicylic Acid Amide  1mg  Caprine Herpesvirus 1(CpHV-1)山羊皰疹病毒1LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20
鹽酸吡格列酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Pioditazone 質(zhì)量規(guī)格:含量測定  大鼠游離(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 96T/48T  ELISAKitHSP-90小鼠熱休克蛋白90規(guī)格:48T/96T

去氧氟尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Doxifluridine/5-Fluoro-5-deoxyuridine質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定  人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TE)試劑盒 Human TE ELISA Kit  HumanApolipoproteinHapo-HELISAKit人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

普羅胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Iopromide質(zhì)量規(guī)格:檢查用  Ratmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAKit大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  人肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

奧美拉唑鈉一水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)Omeprazole  Monohydrate質(zhì)量規(guī)格:含量測定  DNA清除試劑盒20  小鼠白喉IgG抗體試劑盒 Mouse Diphtheria IgG aibody ELISA Kit
隱孢子蟲熒光PCR法檢測試劑盒FCGR2A Others Human CD32a / FCGR2A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫酸巴龍霉素質(zhì)量規(guī)格:≥675 U/mg,USP28Paromomycin Sulfate

人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHAEC miRNA5 μg硫酸巴龍霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Paromomycin Sulfate

SK-N-SH細(xì)胞,神經(jīng)母細(xì)胞瘤 人肺腺鱗癌細(xì)胞,NCI-H596細(xì)胞 人腦血管平滑肌細(xì)胞紫脲酸銨(ACS)質(zhì)量規(guī)格:ACSMurexide

豚鼠源細(xì)胞甲基紫,龍膽紫質(zhì)量規(guī)格:BSmethyl violet

CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硝氮黃質(zhì)量規(guī)格:INDNitrazine yellow

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