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收到凍存細胞的處理方法：
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

大鼠腦動脈血管平滑肌細胞提取物【Rat Brain: Normal Aortic Smooth Muscle Cells Derivatives】大鼠腦動脈血管平滑肌細胞提取物是從大鼠原代腦動脈血管平滑肌細胞提取的，大鼠原代腦動脈血管平滑肌細胞從正常大鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學；<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

產(chǎn)品名稱	大鼠腦動脈血管平滑肌細胞提取物說明
規(guī)格	T25m2
貨號	CS-964187

實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
1135616-49-7 Fmoc-Arg(Me)(Pbf)-OH 5g Porcine Adenovirus(Swine Adenovirus)豬腺病毒LAMP試劑盒

1135686-31-5 Ac-Lys-Gln-Lys-Leu-Arg-AMC 1mg Feline Parvovirus(FPV)貓細小病毒（貓泛白細胞減少癥、貓瘟）LAMP試劑盒

1135686-31-5 Ac-Lys-Gln-Lys-Leu-Arg-AMC 5mg Feline Parvovirus(FPV)貓細小病毒（貓泛白細胞減少癥、貓瘟）LAMP試劑盒

1135688-15-1 Biotin-VAD-FMK 1mg Feline Coronavirus(FCoV )貓RT-LAMP試劑盒

1135688-47-9 Z-AEVD-FMK 1mg Toxophasma gondii剛地弓形蟲LAMP試劑盒
T/G細胞，血管平滑肌細胞 KM小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤瘤株,LⅡ細胞成纖維細胞-胎兒裂解物HDF-f L(2S)-2-N-芴甲氧羰基氨基-2-甲基-6-庚1酸(S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine質(zhì)量規(guī)格：>97%

NEC(食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2潑尼龍1酸鈉Prednisolone phosphate 質(zhì)量規(guī)格：>97%,USP

Caki-1(腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1ABD-F[=4-(氨磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(N)(T))ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)(T)

綿羊皮膚細胞;OAR-S1二茂鐵乙酸(>97.0%(GC))Ferroceneacetic Acid質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)

IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 細胞裂解液 (陽性對照) (肼基羰基)二茂鐵(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記)(Hydrazinocarbonyl)ferrocene質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記
大鼠腦動脈血管平滑肌細胞提取物說明SV40T轉(zhuǎn)化的胚腎細胞;293T達格列凈一水 ;達格列嗪水合物質(zhì)量規(guī)格：>99%Dapagliflozin propanediol hydrate