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上海莼試生物技術有限公司
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大鼠成骨細胞試劑盒操作

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號T25m2

品       牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-16 19:47:37瀏覽次數(shù):123次

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大鼠成骨細胞試劑盒操作收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2培養(yǎng)。

產品名稱

大鼠成骨細胞試劑盒操作

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-963388

 描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
      保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1018946-38-7  DWK-1339 (MDR-1339)  5mg  Semen cassiae決明子染料法PCR鑒定試劑盒 

1018946-38-7  DWK-1339 (MDR-1339)  10mg  Semen cassiae決明子染料法PCR鑒定試劑盒 

1018946-38-7  DWK-1339 (MDR-1339)  25mg  Semen citri reticulatae橘核染料法PCR鑒定試劑盒 

1018946-38-7  DWK-1339 (MDR-1339)  50mg  Semen citri reticulatae橘核染料法PCR鑒定試劑盒 

1018946-38-7  DWK-1339 (MDR-1339)  100mg  Flos chrysanthemi菊花染料法PCR鑒定試劑盒
Altrenogest  中文名:烯丙孕素  分子式:C21H26O2  度:98.0%  甘油0   10g

2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one  中文名:  分子式:C5H6N2OS  度:98.0%  Glycero-phosphate,disalt   50g              

1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  中文名:  分子式:C14H10ClFN2  度:98.0%  胃泌素   英文名稱:   Gasin   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   G

Ropivacaine mesylate  中文名:甲磺酸羅哌卡因  分子式:C18H30N2O4S  度:98.0%  心肌轉錄因子GATA3   英文名稱:   cardiac muscle anscription factor GATA3   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   GATA3

Manidipine di  中文名:鹽酸馬尼地平  分子式:C35H40Cl2N4O6  度:98.0%  心肌轉錄因子GATA4   英文名稱:   cardiac muscle anscription factor GATA4   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   GATA4
大鼠成骨細胞試劑盒操作104113-71-5  1-(1-Naphthyl) piperazine (hydrochloride)  250mg  NADC30-like Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(NADC30-like PRRSV)豬生殖與呼吸綜合癥病毒美洲型NADC30RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)

104113-71-5  1-(1-Naphthyl) piperazine (hydrochloride)  25mg  Peste Des Petits Ruminants Virus Virulent Strain (PPRV-Virulent)小反芻獸疫病毒野毒株RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)

104113-71-5  1-(1-Naphthyl) piperazine (hydrochloride)  50mg  NADC30-like Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(NADC30-like PRRSV)豬生殖與呼吸綜合癥病毒美洲型NADC32株探針法熒光定量RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)

104121-92-8  Eldecalcitol  1mg  Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(HP-PRRSV)高致病豬生殖與呼吸綜合癥病毒美洲型變異株RT-LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)

1041434-82-5  Peramivir Trihydrate  10mg  Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(HP-PRRSV)高致病豬生殖與呼吸綜合癥病毒美洲型變異株探針法熒光定量RT-PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)

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