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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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軍團(tuán)菌熒光PCR法檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-07-19 19:05:46瀏覽次數(shù):180次

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軍團(tuán)菌熒光PCR法檢測試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品特點(diǎn):

高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:軍團(tuán)菌熒光PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
貨號(hào):CP99524
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年儲(chǔ)存條件:
14或-20樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min。
注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,65,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。

1088965-37-0  GSK-923295  50mg  Haemophilus agni阿古尼嗜血桿菌LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1088965-37-0  GSK-923295  5mg  Dengue Virus(DENV)登革病毒通用RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1088991-73-4  MK 6096  100mg  Crossiella equi馬克洛菌LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1088991-73-4  MK 6096  25mg  Crossiella equi馬克洛菌LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1088991-73-4  MK 6096  5mg  Haemophilus agni阿古尼嗜血桿菌LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20
鹽酸地美環(huán)素;去甲基金霉素質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg,BRDemeclocycline   ELISAKitGAP-43人生長相關(guān)蛋白43規(guī)格:48T/96T  人抗腮腺管抗體(ai-parotid duct Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: ai-parotid duct Ab ELISA Kit

鹽酸地美環(huán)素;去甲基金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定,標(biāo)準(zhǔn)品Demeclocycline   小鼠補(bǔ)體成分4a(C4a)ELISA試劑盒 ,英文名: C4a ELISA Kit  RatHeatShockFactor1,HSF1ELISA試劑盒大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

甲基帕羅西汀質(zhì)量規(guī)格:>99%N-Methyl Paroxetine  人促睡眠肽(DSIP)ELISA檢測試劑盒Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISAKit 96T/48T  HumanfactorB,BFELISA試劑盒人B因子(BF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

硫酸頭孢喹諾質(zhì)量規(guī)格:干品Cefquinome>80%,BRCefquinome sulfate  大鼠酪氨酸羥化酶(TH)試劑盒 Rat Tyrosine Hydroxylase,TH ELISA Kit  HumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit人球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
軍團(tuán)菌熒光PCR法檢測試劑盒GAD1 Others Human GAD67 / GAD1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1-萘酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品1-Naphthol

恒河猴腎細(xì)胞;RM-3N-二乙基亞硝胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品N-Nitrosodiethylamine

COS-1細(xì)胞,SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞 人大腸癌細(xì)胞,PA319細(xì)胞 CM-R005大鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL油酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.0%(GC) Oleic acid

大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)反式-9-十八1酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品trans-9-Octadecenoic methyl ester

CD200 Others Human CD200 / OX-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 對(duì)位紅(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于食品分析 Para Red

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