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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T人核糖酶P 熒光PCR法ROX檢測(cè)試劑盒

人核糖酶P 熒光PCR法ROX檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-07-20 20:22:36瀏覽次數(shù):96次

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人核糖酶P 熒光PCR法ROX檢測(cè)試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人核糖酶P 熒光PCRROX檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光PCRROX
貨號(hào):CP99688
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min。

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,543,2。
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

1073485-20-7  LDC000067  10mg  Hypoderma bovis牛皮蠅蛆LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1073485-20-7  LDC000067  10mM(in1mLDMSO)  Hypoderma bovis牛皮蠅蛆LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1073485-20-7  LDC000067  50mg  Cowpox Virus(CPV)牛痘病毒LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1073529-41-5  ABL 127  10mg  Akabane Disease Virus(AKAV)牛赤羽病毒RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

1073529-41-5  ABL 127  1mg  Cowpox Virus(CPV)牛痘病毒LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20
鹽酸替羅非班(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99,標(biāo)準(zhǔn)品Tirofiban HCl  ELISAKitATR1人血管緊張素Ⅱ受體1抗體規(guī)格:48T/96T  羥賴酸糖苷(HOLG)ELISA試劑盒 ,英文名: HOLG ELISA Kit

普魯蘭糖;普魯蘭多糖質(zhì)量規(guī)格:Viscosity100-180 mPa-s;BRPullulan  小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)ELISA試劑盒 ,英文名: PPARα ELISA Kit  rabbitEsadiol,E2ELISA試劑盒兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

維生素 E, 生育酚質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀Vitamin E,dl-α-tocopherol  人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanIerleukin1βconveingenzyme,ICEELISAKit 96T/48T  Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAbELISA試劑盒人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

司他夫定質(zhì)量規(guī)格:>98,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Stavudine  大鼠糖原合成酶試劑盒 Rat glycogen syhetase ELISA Kit  humancaspase4-apoptosis-relatedcysteinepeptidase,Casp4ELISAKit人吡哆/吡哆醇維生素B6激酶(PDXK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人核糖酶P 熒光PCRROX檢測(cè)試劑盒IV型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))4,4'-Difluorobenzophenone質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)

Eca-109-GFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人食管癌細(xì)胞 Eca-109-GFP-puro (pLVT7 leiviral consuct stable sain) in human esophageal cancer cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin1,4-二芐氧基苯(>98.0%(GC))1,4-Dibenzoylbenzene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

IL5 Protein Mouse 重組小鼠 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二1(>97.0%(HPLC)(T))3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)

人內(nèi)殼細(xì)胞(HHirSC)( 5×105 ) mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Mouse二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二鈉(>98.0%(HPLC)(T))Di Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)

恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]雙酚 C(>98.0%(GC))2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
儲(chǔ)存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


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