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上海莼試生物技術有限公司
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恒河猴腎細胞;RM-3操作步驟

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所  在  地上海市

更新時間:2017-05-29 11:02:25瀏覽次數(shù):434次

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恒河猴腎細胞;RM-3操作步驟現(xiàn)貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術指導,另有細胞培養(yǎng)類產品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產品。歡迎廣大科研用戶!
細胞名稱     恒河猴腎細胞;RM-3操作步驟
形態(tài)特性      成纖維細胞樣
生長特性     貼壁生長
特征特性      該細胞系來源于一雌性獼猴的皮膚組織。2004年由中國科學院昆明細胞庫建立。 
培養(yǎng)條件      M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS
傳代方法      1:2傳代;3-4天一次
傳代情況     P3
凍存條件      基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測     熒光法(-)
STR      -
同工酶     
染色體     
使用權限     B類
恒河猴腎細胞;RM-3操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
恒河猴腎細胞;RM-3操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
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激酶和磷酸酶  
蛋白分子量  predicted molecular weight: 90kDa 
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原  KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ERK5 around the phosphorylation site of Ser496 [GP(p-S)AP] 
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide 
產品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500 
(石蠟切片需做抗原修復) 
 not yet tested in other applications.
 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  
保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for 恒河猴腎細胞;RM-3操作步驟greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 
Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 
產品介紹 Extracellular signal related 

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